بكارگيري روش PCR در تشخيص آلودگي كشت هاي سلولي به مايكوپلاسما ساليواريوم

مايكوپلاسما ساليواريوم، يكي از گونه هاي، مايكوپلاسماي اصلي آلوده كننده كشت هاي سلولي محسوب مي شود و مي تواند اثرات نامطلوبي را بر روي كشت هاي سلولي ايجاد كند، در نتيجه شناسايي اين آلودگي و سرعت تشخيص آن، دركنترل و پيشگيري از اين موضوع حائز اهميت مي باشد. كه در اين مطالعه، امكان تشخيص مولكولي مايكوپلاسماساليواريوم با استفاده از روش كاملا اختصاصي واكنش زنجيره پليمراز (PCR)، به عنوان يك روش سريع، حساس و اختصاصي براي تشخيص اين آلودگي در كشت سلولي مورد بررسي قرار گرفت. به منظور راه اندازي اين واكنش PCR از سوي استاندارد مايكوپلاسما ساليواريوم و پرايمرهاي اختصاصي اين گونه براساس تكثيرقطعه اي از ژن 16S rRNA استفاده شد و در ادامه حساسيت و ويژگي اين تست تعيين گرديد. نمونه هاي مورد بررسي پس از استخراج DNA، ازجهت آلودگي به جنس مايكوپلاسماو گونه ساليواريوم مورد آزمايش PCR قرار گرفتند. در اين مطالعه، تعداد 62 نمونه از كشت هاي سلولي ارسالي به آزمايشگاه رفرانس مايكوپلاسما در موسسه رازي مورد بررسي قرار گرفت. كه از اين تعداد 42(67/75 درصد) نمونه از نظرآلودگي به جنس مايكوپلاسما و از اين تعداد، 15(35/72 درصد)نمونه با ايجاد باند در 434bpاز نظر آلودگي به گونه مايكوپلاسما ساليواريوم مثبت بودند. براساس نتايج بدست آمده و بالا بودن درصد آلودگي مايكوپلاسما ساليواريوم، تست PCR راه اندازي شده، يك روش آسان، سريع، كم هزينه و در عين حال با حساسيت و ويژگي بالامي باشد كه با بهره گيري از پرايمرهاي مناسب و اختصاصي امكان شناسايي و تشخيص اين آلودگي را در آزمايشگاه هاي كشت سلولي، دركمتر از يك روز، امكان پذير مي كند.