برسي حساسيت روش RT-PCR براي تشخيص ويروس بيماري نيوكاسل پرندگان

بيماري نيوكاسل يك بيماري ويروسي مسري و حاد ماكيان و ساير انواع پرندگان درجهان است. بيماري نيوكاسل درطيور يكي از مشكلات عمده مرغداري ها مي باشد. تشخيص سريع ويروس بيماري نقش مهمي دركنترل بيماري دارد. در اين آزمايش از سويه ويروس مورد استفاده در واكسن بيماري نيوكاسل براي بررسي حساسيت روش واكنش زنجيره اي پليمراز با نسخه برداري معكوس (RT-PCR) و تشخيص زود هنگام بيماري استفاده شده است. معيار تشخيص حساسيت، حداقل رقت ويروس بيماري درميان سريالي از رقت هاي مختلف تهيه شده از RNA استخراج شده يك نمونه واكسن در نظر گرفته شد.براين اساس، حداكثر حساسيت روش مورد مطالعه، حداقل رقتي است كه در آن همچنان يك باند واضح، قابل تشخيص و با شدت مناسب از فراورده PCR يعني يك قطعه 204 جفت بازي تكثير شده با استفاده از يك جفت نشانگر اختصاصي بر روي ژل آگارز 1/5 درصد تشكيل گردد. نتايج نشان داد كه روش مذكور از حساسيت كافي ومناسب ( تا رقت20-10 برابر از RNA موجود در نمونه اوليه) و نيز سهولت، سرعت و دقت مناسبي براي تشخيص ويروس برخوردار است و استفاده از آن به عنوان يك روش تشخيصي با حساسيت بالا توصيه مي گردد.