توليد پپتيد نوتركيب لاكتوفريسين شتر در ريشته هاي مبين توتون

به كارگيري تكنولوژي DNA نوتركيب باعث توليد بسياري از پروتئينها و پپتيدهاي درماني از منابع متنوع كه توانايي بالقوه درماني دارند گرديده است . يكي از روش هاي توليد پپتيدهاي نوتركيب ، انتقال ژنهاي آنها به سلولهاي گياهي و ايجاد ريشه مويين از اين سلولها با استفاده از روش هاي انتقال ژن و كشت بافت گياهي مي باشد . در اين تحقيق ژن لاكتوفريسين به منظور توليد پپتيد نوتركيب به ريشه هاي مويين گياه توتون منتقل گرديد و پس از توليد ريشه مويين و استخراج پروتئين ميزان خاصيت ضد باكتريايي آن مورد بررسي قرار گرفت . بدين منظور ابتدا ژن مذكور به طريقه مصنوعي سنتز و در وكتور بيان pBI121 همسانه سازي گرديد و با استفاده از PCR و هضم آنزيمي مورد تاييد قرار گرفت .جهت انتقال ژن به گياه از باكتري Agrobacterium rhizogenes و ريزنمونه هاي برگي توتون استفاده شد . تاييد ريشه هاي تراريخت با استفاده از آغاز گرهاي اختصاصي ژن و PCR استفاده شد . براي ارزيابي خاصيت ضد باكتريايي پروتئين نوتركيب پروتئين نوتركيبتوليد شده عمل استخراج پروتئين از ريشه هاي تراژن انجام گرفت و سپس با استفاده از روش انتشار ديكسي خاصيت ضد ميكروبي آن مورد بررسي قرار گرفت . آناليز بدست آمده مقاومت قابل ملاحظه اي نسبت به پروتئين شاهد را نشان داد .