همسانه سازي و انتقال ژن توليد كننده انسولين انساني به گياه نعناع

امروزه بيماري ديابت براي سلامت جهاني يك تهديد جدي محسوب مي شود و درحال حاضر بالغ بر 3/6 درصد از كل جمعيت جهان با بيماري ديابت زندگي مي كنند. باتوجه به افزايش روزافزون بروز بيماري ديابت و از سوي ديگر افزايش هرچه بيشتر تقاضا براي پروتئين انسولين، توسعه سيستم هاي اقتصادي با بازدهي بالاتر براي توليد اين پروتئين مهم از اهميت بسيار بالايي برخوردار است. هدف از اين تحقيق، ابتدا طراحي وساخت وكتور مناسب براي cDNA ي ژن (IGF-1)Insulin-like Growth Factor1 جداسازي شده از سلول هاي انساني و سپس انتقال اين ژن به گياه نعناع به عنوان يك سيستم بسيار مناسب براي بيان پروتئين نوتركيب مي باشد. درمرحله نخست، cDNA ي ژن IGF-1 با اندازه 336 نوكلئوتيد در وكتور پايه pKS همسانه سازي شده و پس از تاييد توالي ژن، به وكتور pBIN61 در مقابل پروموتور CaMV 35S جهت بيان در گياه نعناع منتقل گرديد. درمرحله بعد، وكتور نوتركيب pBIN61-IGF-1 با روش الكتروپوراسيون به سويه هاي LB4404 و GV3303 از آگروباكتريوم انتقال يافت. انتقال وكتور نوتركيب pBIN61-IGF-1 به گياه نعناع با روش كشت همزمان قطعات برگ نعناع با آگروباكتريوم حاوي پلاسميد مذكور انجام يافت. گياهان تراريخته پس از باززايي و گزينش از نظر وجود تراژن و بيان آن بررسي مولكولي شدند. توليد انسولين در گياه نعناع براي نخستين بار در ايران صورت مي گيرد كه پس از بررسي هاي باليني مي تواند براي درمان بيماري هاي ديابتي مورد استفاده قرار گيرد.