همسانه سازي ژن اسموتين دروكتور بياني و بهينه سازي شرايط بيان هترولوگ آن در سيستم پروكاريوتي

پروتئين اسموتين يكي ازاعضاي خانواده ي پروتئين هاي Pathogenesis Related است كه اثرات ضدقارچي آن اثبات شده است. دراين مطالعه جهت همسانه سازي ژن اسموتين در وكتور بياني پروكاريوتي pET26b(+) از سازه pJAA-1 حاوي اين ژن استفاده گرديد. سازه ژني حاصل پس از تاييد توسط الگوي PCR و هضم آنزيمي و نيز تعيين توالي به نام pTAA-2 نام گذار ي شده و به سوش باكتر يBL21 E. coli منتقل شد. نتايج حاصل از بيان اين ژن به روش SDS-PAGE مورد بررسي قرار گرفت. حضور باند پروتئيني تقريبا 25KDa (در محدوده مورد انتظار) نشان دهنده بيان اين ژن در سيستم پروكاريوتي مورد استفاده مي باشد. نتايج حاصل از بهينه سازي شرايط بيان اين پروتئين با استفاده از روش تاگوچي نشان داد كه دماي C° 33 ، IPTG با غلظت 0/7 mM ونمونه برداري در 16 ساعت پس از القا بهترين شرايط براي بيان اين ژن مي باشند. فعاليت ضد قارچي پروتئين بيان شده عليه قارچ هاي بيماري زا در دست مطالعه مي باشد.