شناسايي چندشكلي اگزون 4 ژن هورمون رشد در اسب‌هاي نژاد دو خون استان گلستان با روش PCR-SSCP

ژن هورمون رشد در اسب، روي كروموزوم 11 قرار دارد و داراي 5 اگزون و 4 اينترون است. در اين تحقيق، از سياهرگ سمت چپ 100 رأس اسب موجود در استان گلستان، از مناطق گنبد، آق‌قلا و بندر تركمن، خون‌گيري شد و DNA نمونه‌ها با روش بهينه نمكي، استخراج شد و قطعه 357 جفت باز (بخشي از اگزون 4 ژن هورمون رشد) تكثير شد. از تفاوت چندشكلي فضايي تك رشته (SSCP)، براي تعيين ژنوتيپ نمونه‌ها، استفاده شد. بدين منظور، الكتروفورز عمودي نمونه‌ها روي ژل اكريل‌آميد 30 درصد، به مدت 21 ساعت و با اختلاف پتانسيل 240 ولت، صورت گرفت. همچنين رنگ‌آميزي ژل به روش نيترات نقره، انجام شد. نتايج حاصل از تعيين ژنوتيپ به وسيله SSCP نشان داد، كه سه الگوي باندي متفاوت وجود دارد. باتوجه‌ به چند شكل بودن اين جايگاه ژني، مي‌توان از آن در مطالعات همبستگي بين ژنوتيپ و صفات اقتصادي مرتبط با اسب بهره جست.

Growth hormone is the most abundant anterior pituitary hormone as a key hormone in metabolic processes such as growth, reproduction and aging. The growth hormone gene is a candidate gene for the growth of domestic animals, and growth hormone plays an important role in metabolism and growth. In the present study, the blood samples were randomly taken from the veins of 100 horses in Golestan province, from Gonbad, Agh Qola and Bandar Turkmen areas, and the DNA of samples were extracted using the modified salting out method and a 357 bp fragment (part of exon 4 of the growth hormone gene) was amplified. Single-stranded spatial polymorphism (SSCP) was used for genotyping of the samples. For this purpose, vertical electrophoresis of samples on 14% acrylamide gel and gel staining by silver nitrate method were used. The results of genotyping showed that there are three different band patterns. Considering the polymorphism of this gene locus, it can be used in association studies between genotype and economic traits of horses.