غربالگري باكتري‌هاي تجزيه‌كننده نفت خام از روده ماهي Lethrinus crocineus و Brachirus orientalis در خليج فارس

Screening of crude oil-degrading bacteria from the intestine of Lethrinus crocineus and Brachirus orientalis in the Persian Gulf

ميكروبيوم روده تاثير اساسي بر سلامت ماهي دارد و تحت تاثير چندين آلاينده آلي و معدني پايدار و مضر است. يكي از عوامل مخرب اكوسيستم خليج فارس نفت خام است. بهترين روش جهت پاكسازي اين اكوسيستم روش تجزيه زيستي است. در اين روش از ميكروارگانيسم‌ها براي حذف موثر آلودگي‌هاي هيدروكربني استفاده مي‌شود. در اين تحقيق نمونه‌ ماهي Lethrinus crocineusو Brachirus orientalis از منطقه خارك و لارك جمع‌آوري شد. يك سانتيمتر مربع از قسمت داخلي روده ماهي با استفاده از چاقوي استريل جدا شد و در 100 ميلي ليتر بافر فسفات نمكي(PBS) حل شد و يك محلول امولسيوني بدست آمد كه يك ميلي‌ليتر از اين محلول درون لوله‌هاي آزمايش حاوي 9 ميلي ليتر بافر فسفات انتقال داده شد. شمارش باكتري‌هاي تجزيه‌كننده و هتروتروف با روش MPNو CFU انجام شد. باكتري‌هاي تجزيه‌كننده نفت خام، غربالگري شدند. در نهايت با روش مولكولي شناسايي شدند كه شان داد متعلق به جنس Acinetobacter radioresistens مي‌باشد. نتايج حاصل از شمارش باكتري‌هاي هتروتروف و تجزيه‌كننده نشان داد كه بيشترين تعداد باكتري‌هاي تجزيه‌كننده و هتروتروف مربوط به ماهي Brachirus orientalis مي‌باشد. سويه BJ-4 داراي بيشترين فعاليت امولسيون‌كنندگي، رشد(OD) و درصد تجزيه بود كه به‌عنوان سويه برتر انتخاب شد. نتايج حاصل از بهينه‌سازي نشان داد كه بهترين شرايط بهينه براي تجزيه، محيط بوشنل هاس براث، نفت 5/1%، منبع عصاره مخمر 1%، گلوكز 2%، منبع كربن و كشت منفرد است.

The gut microbiome has a fundamental impact on fish health and is affected by several persistent and harmful organic and inorganic pollutants. Crude oil is one of the destructive factors of the Persian Gulf ecosystem. The best way to clean this ecosystem is the biodegradation method. In this method, microorganisms are used to remove hydrocarbon pollution effectively. In this research, Lethrinus crocinus and Brachirus orientalis fish samples were collected from the Khark and Lark regions. One square centimeter of the inner part of the fish intestine was removed using a sterile knife and dissolved in 100 ml of phosphate-buffered saline (PBS). An emulsion solution was obtained, and one milliliter of this solution was transferred into test tubes containing 9 milliliters of phosphate buffer. Decomposing and heterotrophic bacteria were counted using MPN and CFU methods. Crude oil-degrading bacteria were screened. Finally, it was identified by molecular method that they belong to the genus Acinetobacter radioresistens. The counting of heterotrophic and decomposing bacteria showed that the highest number of decomposing and heterotrophic bacteria is related to Brachirus orientalis fish. BJ-4 strain had the highest emulsification activity, growth (OD), and decomposition percentage, which was selected as the superior strain. The results of optimization showed that the best optimal conditions for decomposition are Bushnell-Hass broth medium, 1.5% oil, 1% yeast extract source, 2% glucose, carbon source, and single culture.