توليد آنزيم كراتيناز بوسيله‌ي ميكروارگانيسم هاي جدا شده از نمونه ‌هاي خاك مرغداري

Keratinase enzyme production by microorganisms isolated from poultry soil samples

امروزه در جهان، مقدار زيادي ضايعات حاوي كراتين مانند پر و پشم به عنوان محصولات جانبي توليد مي‌شوند. براي بازيافت بهتر كراتين و ضايعات كراتينه مي‌توان از آنزيم كراتيناز بهره برد. گروهي از ميكروارگانيسم‌ها مانند باكتري‌ها، قارچ‌ها قادر به توليد آنزيم كراتيناز و تخريب ضايعات كراتينه هستند. اين آنزيم كاربرد‌هاي گسترده‌اي در صنايع مختلف از جمله صنايع چرم سازي، نساجي، شوينده‌ها، محصولات آرايشي، تهيه‌ي كود و داروسازي دارد. در پژوهش حاضر، نمونه‌هاي خاك از مزارع مرغداري جمع آوري ، سپس باكتري‌هاي موجود درخاك بوسيله‌ي روش‌هاي رقت سازي و صفحه پخش جداسازي شدند و با استفاده از محيط كشت‌هاي Skim milk agar و حاوي پودر پر باكتري‌هاي كراتيناز مثبت غربالگري شدند و براي شناسايي با روش‌هاي بيوشيميايي و روش مولكولي مورد بررسي و تحقيق قرار گرفتند. همچنين بهينه سازي آنزيم بوسيله سوبسترا‌هاي مختلفي از جمله منابع مختلف كراتين، منابع نيتروژن گوناگون، دما‌ و pH هاي مختلف انجام شد كه در نتيجه حداكثر توليد آنزيم در حضور پودر پر، عصاره مخمر، دماي ۳۷ درجه سانتي گراد و 5/7 pH داراي فعاليت آنزيمي 32/0 ميكرومول بر دقيقه مي باشد.

Today, in the world, a large amount of keratin-containing wastes such as feathers and wool are produced as by-products. For better recycling of keratin and keratin wastes, keratinase enzyme can be used. A group of microorganisms such as bacteria, fungi are able to produce keratinase enzyme and destroy keratin waste. This enzyme has wide applications in various industries, including leather, textile, detergents, cosmetics, fertilizer and pharmaceutical industries. In the current research, soil samples were collected from poultry farms, then the bacteria present in the soil were isolated by dilution and spread plate methods and were screened using Skim milk agar culture medium containing powder full of keratinase positive bacteria and for identification by biochemical methods and Molecular methods were investigated and researched. Also, enzyme optimization was done by different substrates including different sources of kereatine, different nitrogen sources, different temperature and pH, as a result of which maximum enzyme production in the presence of feather powder, yeast extract, temperature of 37C and pH = 7.5 and enzyme activity obtained 0.32 micromol/min.