بررسي اثر مهاركننده 1-41SZLP بر بيان ژن پروتئين 27P در رده سلولي -6N

Investigation of the Inhibitory Effect of SZLP1-41 on the Expression of P27 Protein in NALM-6 Cell Line

لوسمي لنفوبالستيك حاد پيشساز سلول B يك نوع شايع بدخيمي خوني دوران كودكي است. درمان هدفمند )Targeted Therapy )نوعي از روش درماني است كه رشد سلولهاي سرطاني را از طريق دخالت درعملكرد و ميزان مولكولهاي خاصي كه در سرطانزايي و رشد تومور دخالت دارند، متوقف كرده و سبب القاي آپوپتوز در سلولهاي سرطاني ميشود.كاهش سطح پروتئين 27P در بسياري از سرطان ها، همچنين افزايش بيان پروتئين 2SKP در بسياري از سرطان ها به عنوان يك ماركر سرطاني گزارش شده است. مهار پروتئين 2SKP باعث توقف تكثير سلولي و شروع آپوپتوز مي شود. هدف از اين مطالعه بررسي اثر مهار كننده 1-41SZLP بر سلول هاي لوسمي لنفوبالستيك حاد پيش ساز سلول B است. مواد و روش: سلول هاي -6NALM ، رده سلولي پيش ساز سلولB در محيط كشت -1640RPMI حاوي %10 FBS و%1 آنتي بيوتيك هاي پني سيلين و PP25 كشت وتكثير شدند. براي تعيين غلظت هاي سميت سلولي 3 استرپتومايسين در دماي °C37 وفشار 2CO 5% در فالسك تعيين براي .شد انجام µg/ml350,µg/ml250 µg/ml150 ،µg/ml50هاي غلظت در MTT تست SZLP1-41 مهاركننده نوع مرگ القا شده در اثر تيمار با مهاركننده 1-41SZLP آناليز فلوسايتومتري انجام شد و پس از ان بيان ژن27P با استفاده از PCR time real بررسي شد. نتايج: آناليز سميت سلولي نشان داد كه 1-41SZLP در غلظت هاي باالتر از ml/µg300موجب القاي مرگ در سلول هاي لوسمي لنفوبالستيك حاد پيش ساز سلول B شد. بيان ژن 27P با افزايش دوز مهاركننده1-41SZLP نسبت به گروه كنترل افزايش يافت. بحث و نتيجه گيري: مهار كننده 1-41SZLP با مهار پروتئين 2SKP و افزايش بيان ژن پروتئين 27P احتماال باعث توقف چرخه سلولي از مرحله 1G به S از طريق اتصال به CDK1-D Cyclin و-CyclinE 2CDKو شروع آپوپتوز در سلول هاي -6NALM شد

Acute lymphoblastic leukemia (ALL) is a common childhood hematological malignancy. Targeted therapy is a treatment approach that inhibits the growth of cancer cells by interfering with the function and levels of specific molecules involved in cancer initiation and tumor growth, leading to apoptosis in cancer cells. Reduced levels of P27 protein in many cancers, as well as increased expression of SKP2 protein, have been reported as cancer markers. Inhibiting SKP2 protein leads to cell cycle arrest and initiation of apoptosis. The aim of this study is to investigate the inhibitory effect of SZLP1-41 on precursor B-cell acute lymphoblastic leukemia (B_x0002_ALL) cells . NALM-6 cells, a precursor B-cell line, were cultured in RPMI-1640 medium containing 10% FBS and 1% penicillin-streptomycin antibiotics at 37°C and 5% CO2 pressure in a 25 cm3 flask. The MTT assay was performed to determine the cytotoxic concentrations of the SZLP1-41 inhibitor at concentrations of 50µg/ml, 150µg/ml, µg/ml, and 350µg/ml. Flowcytometry analysis was carried out to determine the type of cell death induced by SZLP1-41 treatment, and the expression of P27 gene was examined using real-time PCR. Results: Cellular toxicity analysis revealed that SZLP1-41 induced cell death in precursor B-ALL cells at concentrations higher than 300µg/ml. The expression of the P27 gene increased with higher doses of the SZLP1-41 inhibitor compared to the control group. The SZLP1-41 inhibitor, by inhibiting SKP2 protein and increasing the expression of the P27 protein, likely leads to cell cycle arrest from the G1 to S phase through interaction with Cyclin D1-CDK and Cyclin E-CDK2, initiating apoptosis in NALM-6 cells.