بررسي اثر سم شقايق دريايي )haddoni Stichodactyla )بر بيان ژن كانال پتاسيم و سديم و مكانيسمهاي مرگ سلولي

Investigating the effect of sea anemone (Stichodactyla haddoni) toxin on potassium and sodium channel gene expression and cell death mechanisms

سرطان دومين عامل مرگ و مير در سراسر جهان است. شيمي درماني يكي از روشهاي اصلي درمان بسياري از سرطانها از جمله سرطان ريه است، زيرا سميت و عوارض جانبي نامطلوب آن، جديدترين تحقيقات دارويي به يافتن منابع طبيعي جايگزين با عوارض جانبي كمتر اختصاص دارد. سم phylum Cnidaria حاوي پروتئين هاي فعال زيستي و پپتيدهايي است كه خواص ضد سرطاني دارند. در اين مطالعه، اثر سم شقايق دريايي Stichodactyla haddoni بر روي سلولهاي سرطاني ريه 549A و سلولهاي NIH به عنوان سلولهاي غيرسرطاني بررسي شد. روش بررسي: عصاره متانولي شقايق دريايي haddoni .S استخراج و ليوفيليز شد. سلول هاي 549A و NIH با غلظت عصاره سريال )300-50 ميكروگرم بر ميلي ليتر( و پپتيد )ml/μg500-1500 ShK )تيمار شدند. ميزان بقاي سلولي پس از ،24 48 و 72 ساعت با روش MTT اندازه گيري شد. چرخه سلولي و توليد ROS درون سلولي با استفاده از فلوسيتومتري اندازهگيري شد. بيان ژن هاي 4KCNC، A9SCN و 1YAP با استفاده از تكنيك PCR time-Real گزارش شد. يافته ها: 50IC عصاره شقايق دريايي روي رده سلولي 549A بعد از 24 ساعت 50 ميكروگرم بر ميلي ليتر، بعد از 48 ساعت 67 ميكروگرم بر ميلي ليتر و بعد از 72 ساعت 70 ميكروگرم بر ميلي ليتر بود. با افزايش غلظت عصاره شقايق دريايي از 25 به 75 ميكروگرم در ميلي ليتر، ميزان آپوپتوز افزايش يافت. ROS داخل سلولي و بيان ژن 4KCNC، A9SCN و 1YAP به ترتيب نسبت به گروه كنترل افزايش و كاهش مي يابد. نتيجه گيري: سم شقايق دريايي haddoni .S يك عامل ضد سرطان طبيعي بالقوه به صورت وابسته به غلظت و مستقل از زمان با تأثير بر A9SCN 4,KCNC است

Cancer is the second leading cause of death worldwide. Chemotherapy is one of the main methods of treatment of many cancers, including lung cancer, as its toxicity and adverse side effects, most recent pharmaceutical research is devoted to finding alternative natural sources with fewer side effects. The Cnidaria phylum toxin contains bioactive proteins and peptides that have anticancer properties. In this study, the effect of Stichodactyla haddoni sea anemone toxin on A549 lung cancer cells and NIH cells as noncancerous cells was investigated. The methanolic extract of sea anemone S. haddoni was extracted and lyophilized. A549 and NIH cells were treated with a serial extract concentration (50-300 μg/ml( and peptide (ShK 500- 1500μg/ml(. The cell survival rate after 24, 48, and 72 hours was measured with MTT assay. Cell cycle and intracellular ROS production were measured using flow cytometry. Expression of KCNC4, SCN9A, and YAP1 genes was reported using real-time PCR technique. the IC50 of sea anemone extract on the A549 cell line was 50 μg/ml after 24 hours, 67 μg/ml after 48 hours, and 70 μg/ml after 72 hours. with the increase in the concentration of sea anemone extract from 25 to 75 μg/ml, the apoptosis rate increased. The intracellular ROS and gene expression of KCNC4, SCN9A, and YAP1 respectively increase and decrease compared to the control group. The toxin of the sea anemone S. haddoni is a potential natural anticancer agent in a concentration-dependent and time-independent manner by affecting KCNC4, SCN9A.