فناوري كشت و ارزيابي ميكروبيولوژي Coli.E و استرپتوكوك – انتروكوك روده اي به عنوان ميكروارگانيسم هاي موجود در آب و فاضالب به روش كشت سطحي

Microbiological Assessment of Water and Wastewater Quality Using the Spread Plate Technique, Focus on E. coli and Streptococcus-Enterococcus faecalis

يكي از شاخصهاي اصلي براي پايش آب و پساب خانگي، صنعتي و يا ديگر مصارف، تعداد كليفرم به خصوص باكتري اشريشياكلي يا كليفرمهاي گرم مثبت مي باشد كه به عنوان يك معيار و شاخص براي بررسي كيفيت آب و پساب خروجي شناخته ميشوند و واكنشهاي اين گروه با محيط هاي كشت متفاوت مورد مطالعه قرار ميگيرد. با توجه به اينكه زيستگاه اشرشيا كلي روده انسان و حيوانات خون گرم ميباشد تفسير آزمون آن دشوار است زيرا برخي از باكتْريهاي كليفرم در خاك و آبهاي سطحي وجود دارند و الزاماً در روده نميباشند بنابراين وجود باكتريهاي كليفرم، گرچه اثبات كننده آلودگي مدفوعي نيست اما، ميتواند نشانه نقص در تصفيه انبارش و يا توزيع آب باشد. آزمونهايي كه براي شناسايي و شمارش ارگانيزمهاي شاخص و پاتوژنها وجود دارند؛ شامل دو روش براي كلي فرمها مي باشد: روش پليت گذاري (CFU (و روش تخمير چند لوله اي (MPN (. در روش تخمير چند لوله اي گزارش نتايج را معموالً به صورت MPN اعالم ميكنند؛ اين در حالي است كه اين تعداد شمارش، تعداد واقعي نميباشد و تقريباً شاخص محتمل ترين تعداد باكتري هاي كلي فرمي)MPN )است كه از نتايج بدست آمده از آزمون حاصل گرديده است. در مقايسه، روش پليت گذاري مستقيم شمارش در 100 ميلي ليتر نمونه در روش (Unit Forming Colony(CFU ؛ كارشناس قادر به شمارش واقعي كلني هاي كليفرمي ميباشد. آلودگي پاتوژني آب توسط استرپتوكوك- انتروكوك مدفوعي مشخص ميگردد. انتظار مي رود كلـيفــرم هـاي غيرگرما پاي نسبت به كلي فرمهاي گرماپاي در شرايط نامساعد محيطي آب مقاوم تر بوده به مدت طوالني تري زنده بمانند . شمارش باكتريهاي هتروتروف با روشهاي پورپليت، گسترده يا كشت سطحي، صافي غشايي و يا روشهاي سوبستراي آنزيمي چند محفظه اي انجام ميگردد. اين روشها تعداد باكتري هاي زنده را تخمين ميزند كه در نتيجه، اطالعات مفيدي درباره كيفيت آب و اهميت نتايج آزمونهاي كليفرم ارائه مي دهند. استانداردهاي كيفي آب، coli.E و استرپتوكوك- آنتروكوك روده اي را به عنوان شاخصهاي آلودگي فكـال در نظر گرفته است. براي تخليه اين آبها ميبايست حدود مجاز تعريف شده توسط سيستم ملي تخليه آلودگي را رعايت نمود. با توجه به اين كه براي تخليه پساب به آبهاي ساحلي، تفريحي و درياهاي ايران )خليج فارس، درياي عمان، درياي خزر( استاندارد خروجي به دريا توسط سازمان حفاظت محيط زيست معاونت محيط زيست دريايي و تاالب ها در سال 1399 تهيه شده است پايش باكتريهاي انتروكوكسي و coli .E الزامي خواهد بود. در اين مقاله به روش اندازه گيري Coli.E و فكال كليفرم و استرپتوكوك- آنتروكوك روده اي به روش CFU كشت سطحي كه شاخص ميكروبي پساب خروجي به دريا است مي پردازيم.

Monitoring the quality of water and wastewater is crucial for various applications, including domestic, industrial, and recreational purposes. Key indicators for this assessment include coliform bacteria, particularly Escherichia coli, and gram-positive coliforms. Distinguishing between these groups is essential as some coliform bacteria may naturally occur in soil and surface water, not necessarily originating from the intestinal tract. While the presence of coliform bacteria doesn t definitively indicate fecal contamination, it may signal issues in storage or water distribution. Two primary methods for assessing coliforms are the plating method measured in Colony Forming Units (CFU) and the multi-tube fermentation method (Most Probable Number, MPN). Two primary methods are employed for general coliform assessment: the plating method (measured in Colony Forming Units, CFU) and the multi-tube fermentation method (Most Probable Number, MPN). In the MPN method, the results are typically expressed as an estimate rather than an exact count, representing the most probable number of coliform bacteria obtained from the test results. In contrast, the CFU method involves direct plating and counting the actual coliform colonies per 100 ml of sample. Counting of heterotrophic bacteria is done by pour plate methods, spread plate technology, membrane filtration (MF), or multi-compartment enzyme substrate methods. These methods assess the quantity of viable bacteria, yielding valuable insights into water quality and the interpretation of coliform test outcomes. Water quality standards designate E. coli and intestinal Streptococcus - Enterococcus faecalis as indicators of fecal contamination. Adherence to permissible limits, as outlined by the national pollution discharge system, is imperative for water discharge into coastal and marine environments. Given the standards set forth by the Environmental Protection Organization for the discharge of effluents into Iran s coastal waters, close monitoring of Enterococci and E. coli levels becomes essential. This article outlines the utilization of the Spread Plate Technique (CFU) method for quantifying E. coli and fecal coliforms, as well as intestinal streptococci-enterococci, providing a valuable microbial index for effluents destined for marine discharge.