بررسي اثرات سميت سلولي پُست بيوتيك هاي تهيه شده از لاكتوباسيلوس اسيدوفيلوس LA-5 بر سلول هاي سرطاني اپي تليال روده (HCT-116)

مقدمه و هدف: هدف از اين مطالعه، تهيه دو نوع پست بيوتيك لاكتوباسيلوس اسيدوفيلوس LA-5 در محيط كشت كلاسيك (MRS; De Man,Rogosa and Sharpe agar) و مايع آب پنير و مقايسه اثرات سايتوتوكسيك آن ها بر سلول هاي HCT-116 به-عنوان مدلي از سلول هاي اپي تليال روده بود. روش كار: ابتدا به منظور تهيه پست بيوتيك، پودر ليوفيليزه لاكتوباسيلوس اسيدوفيلوس به محيط كشتMRS broth و سوسپانسيون آن به آب پنير فراپالايش تلقيح گرديد و در دماي 1±37 به مدت 24 ساعت در انكوباتور CO2دار، گذاشته شد. بعد از گذراندن مدت زمان انكوباسيون و مشاهده رشد، از سانتريفيوژ با دور 4000 دور در دقيقه، به مدت پنج دقيقه براي جداسازي باكتري و مايع رويي استفاده شد. در نهايت مايع به دستگاه خشك كن انجمادي تحت خلاء (به مدت 48 ساعت تحت دماي 2 2- درجه سانتي گراد و فشارmTorr 100) منتقل و خشك گرديد و پست بيوتيك تهيه شده مورد استفاده قرارگرفت. براي ارزيابي اثرات سميت سلولي پست بيوتيك ها در غلظت هاي 625/0، 25/1، 5/2، 5، 10، 20 و 40 ميلي‌گرم بر ميلي‌ليتر از تست MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide) و براي شمارش سلول هاي زنده از تست تريپان بلو استفاده شد. يافته ها: نتايج حاصل از تست MTTحاكي از كاهش معني‌دار زنده‌ماني سلول‌هاي HCT-116 تحت تيمار با پست بيوتيك ها به-صورت وابسته به غلظت بود، به طوري كه در غلظت بالا (10، 20 و 40 ميلي‌گرم بر ميلي‌ليتر براي MRS و مايع آب پنير) از ديدگاه آماري باعث كاهش معني‌داري در ميزان زنده‌ماني سلول‌هاي HCT-116 از طريق كاهش فعاليت ميتوكندريايي يا ظرفيت احيائي ميتوكندري در آن‌ها گرديد. نتيجه گيري: شدت تغييرات و سميت سلولي در پست‌بيوتيك حاصل از كشت باكتري درMRS براث شديدتر از پست‌بيوتيك حاصل از كشت باكتري در آب پنير بود