بررسي ميزان آلودگي به اشريشياكلي O157:H7 در همبرگرهاي عرضه شده در شهرستان اروميه به روش كشت ميكروبي و Multiplex PCR و ارزيابي الگوي مقاومت آنتي‌بيوتيكي جدايه ها

مقدمه: همبرگر از فرآورده هاي گوشتي پر‌مصرف در سطح جهان مي‌باشد. اشريشياكلي O157:H7 از سروتيپ هاي اشريشياكلي خونريزي دهنده روده اي (EHEC) مي‌باشد كه بيماري هاي مهم و خطرناكي را در انسان ايجاد مي‌كند. مدفوع گاو، مخزن اين باكتري بوده و گوشت گاو به‌دليل عدم رعايت موازين بهداشتي در مراحل كشتار به اين باكتري آلوده مي‌گردد. هدف از بررسي حاضر، تعيين ميزان آلودگي همبرگرهاي عرضه شده در شهرستان اروميه به اشريشياكلي O157:H7 و تعيين الگوي مقاومت آنتي‌بيوتيكي جدايه مي‌باشد. مواد و روش كار: ابتدا با بررسي ميداني، كارخانه هاي عرضه‌كننده همبرگر در فروشگاه هاي عرضه مواد پروتئيني شهر اروميه شناسايي شدند و تعداد 50 نمونه به‌صورت سهميه اي و در فواصل زماني مختلف و با رعايت شرايط سترون اخذ شدند. در آزمايشگاه كنترل كيفي مواد غذايي، ابتدا با استفاده از روش‌هاي استاندارد ميكروب‌شناسي اشريشياكلي از نمونه‌ها جداسازي شد. جهت جداسازي سروتيپ O157 اشريشياكلي، جدايه ها در آگار سوربيتول مك‌كانكي (SMAC) كشت داده شدند و پس از مشاهده پرگنه هاي بي رنگ و با استفاده از آنتي سرم اختصاصي، سروتيپ O157 شناسايي شدند. تاييد نهايي جدايه‌هاي اشريشياكلي O157:H7 با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي و حضور ژن هاي rfbO157 و flicH7 صورت پذيرفت. آنتي‌بيوگرام جدايه ها به‌روش انتشار ديسك با استفاده از آنتي‌بيوتيك‌هاي آمپي‌سيلين، آموكسي‌سيلين-كلاوولانيك اسيد، آزيترومايسين، تري‌متوپريم سولفامتوكسازول، جنتامايسين، سفيكسيم، سفترياكسون، سيپروفلوكساسين، نيتروفورانتوئين و تتراسايكلين انجام شد. نتايج: از مجموع 50 نمونه همبرگر مورد آزمايش، همه نمونه ها (100 درصد) آلوده به اشريشياكلي بودند. 21 جدايه براساس داده هاي ميكروب شناسي و سرم شناسايي سروتيپO157 تشخيص داده شدند. نتايج PCR نشان داد كه 18 جدايه (36 درصد) داراي ژن rfbO157 به اندازه 259 bp و ژن flicH7 به اندازه 625 bp بوده و به‌عنوان سروتيپ O157:H7 شناسايي شدند. هم‌چنين درصد مقاومت آنتي‌بيوتيكي جدايه ها عبارت‌ بودند از: آمپي‌سيلين، 72 درصد، تري‌متوپريم سولفامتوكسازول، 56 درصد، سفترياكسون، 50 درصد، تتراسايكلين، 50 درصد، نيتروفورانتوئين، 28 درصد، آموكسي‌سيلين-كلاوولانيك اسيد، 28 درصد، سفيكسيم، 17 درصد، سيپروفلوكساسين، 17 درصد و جنتامايسين، صفر درصد. نتيجه گيري: آلودگي همبرگرهاي عرضه شده در شهرستان اروميه به اشريشياكلي O157:H7 بالا مي‌باشد و نظر به اينكه اين سروتيپ باعث بيماري هاي خطرناكي در انسان مي‌گردد؛ لزوم نظارت بر رعايت موازين بهداشتي در كشتارگاه ها و كارخانه هاي فرآورده هاي گوشتي به‌صورت جدي وجود دارد. با توجه به حساسيت 100 درصدي جدايه ها نسبت به جنتامايسين پيشنهاد مي‌گردد از اين آنتي بيوتيك براي درمان بيماري هاي كوليت خونريزي دهنده و سندرم اورميك هموليتيك (HUS) ناشي از اشريشياكلي O157:H7 استفاده گردد.