خالص سازي نانو بادي توليد شده بر عليه باكتري سودوموناس آئروژينوزا (Pseudomonas aeruginosa) با استفاده از كروماتوگرافي تعويض يوني

Purification of nanobody produced against Pseudomonas aeruginosa using ion exchange chromatography

شتر سانان داراي آنتي بادي ها مي باشند كه تنها شامل زنجيره ي سنگين بوده و به آن نانوبادي گفته مي شود. از مزاياي نانوبادي ها مي توان به ، حلاليت بالا،مقاومت بيشتر در برابر شرايط نامناسب محيطي ،تمايل و اختصاصيت زيادبه آنتي ژن اشاره نمود . سودوموناس آئروژينوزا يكي ازمهمترين پاتوژن هاي فرصت طلب و سومين عامل عفونت هاي بيمارستاني بوده كه مقاومت آنتي يوتيكي رو به افزايش دارد. جهت خالص سازي نانوبادي توليد شده بر عليه سودوموناس آئروژينوزا از كروماتوگرافي تعويض يوني در دو بستر DEAE- سلولز و CM-Sephadex c50 همراه با چهار PH استفاده شد براي تعيين ميزان خلوص از الكتروفورز پلي اكريل آميد سديم دودسيل سولفات استفاده و ميزان پروتئين با تكنيك برافورد مورد سنجش قرار گرفت . نتايج نشان داد كه استفاده ازكروماتوگرافي CM-Sephadex c50 جهت خالص سازي مناسب تر بوده و نانوبادي تهيه شده با استفاده از كيتوزان بعنوان ادجوانت در فراكسيون با غلظت كلريد سديم 4/0مولار واجد تك باند 40 كيلودالتوني در PH هاي 5و6و7 مي باشد. همچنين نانوبادي تهيه شده با استفاده از آلژينات كلسيم بعنوان ادجوانت در فراكسيون با غلظت كلريد سديم 5/0مولار تنها در PH 6 تك باند 40 كيلو دالتوني دارد .