خالص سازي Whey Acidic Protein از شير شتر

Purification of Whey Acidic Protein from camel milk

(WAP) Whey Acidic Protein غني ازآمينواسيدهاي سيستئيني است و در سنتزگلوتاتيون نقش دارند، بسيار حائز اهميت مي باشد.در اين تحقيق شير شتر تك كوهانه از تركمن صحراتهيه گرديد. جهت خالص سازيWAP از كروماتوگرافي تعويض كاتيوني با رزينCM Sephadex C-50 وسپس كروماتوگرافي ژل فيلتراسيون با رزينSephadex G-50 استفاده گرديد. براي اندازه گيري WAPاز روش برادفورد استفاده گرديد. بمنظورتاييد خالص سازي از SDS- PAGEو آزمايش اسكال استفاده شد. بر اساس روش اسكال غلظت N- استيل گلوكزآمين در فراكسيون هاي مذكور محاسبه گرديد. نتايج حاصل از SDS-PAGE، وجود تك باند را در محدوده وزن مولكولي 13 كيلودالتون (WAP) در فراكسيون هاي 18، 19 و20 را نشان دادو تمايز WAP از ليزوزيم توسط آزمايش اسكال انجام گرفت. نتايج نشان داد كه بيشترين مقدار N- استيل گلوكزآمين (µg/ml 73/70) در حضور ليزوزيم بوده در فراكسيون هاي 18، 19 و20 استخراج شده از ستون ژل فيلتراسيون، در مقايسه با مخلوط واكنش محتوي ليزوزيم بسيارك بود بنابراين فراكسيون هاي مذكوردارايWAP مي باشند. مقدار غلظت WAP در فراكسيون ها ي 18، 19 و20 به ترتيب 59، 72 و 49 ميكروگرم بر ميلي ليتر محاسبه شد.