تاثير اتانول و هيپوكلريت سديم بر از بين بردن آلودگي سطحي ريزنمونه هاي درخت گردو (Juglans regia L.) در شرايط درون شيشه اي

The effect of ethanol and sodium hypochlorite on the removal of surface explants of walnut (Juglans regia L.) under in vitro conditions

گردو با نام علميJuglans regia L. از خانواده Juglandace به طور گسترده در طب سنتي از جمله درمان آسم، اختلالات پوستي، ديابت و اختلال عملكرد تيروئيد استفاده مي شود. پوست سبز گردو داراي تركيبات فنولي مي باشد كه بيماري هاي قلبي-عروقي را كاهش مي دهد و از انواع سرطان جلوگيري مي كند. همچنين به عنوان ضد باكتري و ضد قارچ عمل مي كند. به دليل وجود مشكلات تكثير از طريق بذر و قلمه و همچنين به علت آلودگي هاي نامشخص دروني در ريزنمونه هاي مختلف آن در شرايط درون شيشه اي، پژوهش حاضر به منظور دستيابي به تكثير سريع گردو از طريق كشت بافت و با هدف تعيين روش مناسب ضدعفوني قطعات گره دار نيمه خشبي اين گياه انجام پذيرفت. بدين ترتيب، آزمايشي به صورت فاكتوريل در قالب طرح پايه كاملا تصادفي در سه تكرار انجام شد. تيمارها شامل زمان هاي مختلف كاربرد محلول اتانول70 درصد (به مدت صفر، 30، 60 و 120 ثانيه) و غلظت هاي مختلف هيپوكلريت سديم (صفر، 10، 20 و30 درصد) به مدت 20 دقيقه بودند. براي تهيه محلول ها و آب شويي از آب مقطر استريل استفاده شد. در كليه مراحل ضدعفوني و شستشو، ظرف حاوي ريزنمونه تكان داده مي شد. ريزنمونه ها پس از تيمار روي محيط كشت DKW فاقد تنظيم كننده هاي رشد قرار داده شدند، پس از گذشت 14روز، نتايج نشان داد با افزايش زمان اتانول 70 درصد و غلظت هيپوكلريت سديم از ميزان آلودگي قارچي و باكتريايي كاسته مي شود ولي ميزان سياه شدگي ريزنمونه-ها افزايش مي يابد. بنابراين، كاربرد اتانول 70 درصد به مدت 30 تا 60 ثانيه و هيپوكلريت سديم با غلظت 10 درصد به مدت 20 دقيقه توصيه مي شود.