اثر سايتوتوكسيسيتي سوپرناتانت Lacticaseibacillus paracasei بر رده سلولي سرطان روده بزرگ (HT-29)

Cytotoxicity effect of Lacticaseibacillus paracasei supernatant on colon cancer cell line (HT-29)

مقدمه و هدف: سرطان روده يكي از مهمترين عوامل مرگ و مير انسان مي باشد. به همين دليل يافتن مواد جديد با منشا طبيعي از باكتريهاي بومي احساس مي شود. اين مطالعه با هدف بررسي تاثير سايتوتوكسي سوپرناتانت Lacticaseibacillus paracasei LB12 بر رده سلولي سرطان روده بزرگ (HT-29) انجام شد. مواد و روش ها: ابتدا سويه LB12 L. paracasei در محيط MRS براث كشت داده شد. سپس در دور rpm 5000 به مدت 15دقيقه سانتريفيوژ شد و سوپرناتانت (مايع رويي) جداسازي و از فيلتر 22/0 ميكرومتر عبور داده شد. در نهايت سوپرناتانت ليوفيليزه شد. براي بررسي فعاليت سايتوتوكسيك، رده سلولي HT-29 در غلظتهاي مختلف سوپرناتانت سويه L. paracasei در مدت زمانهاي 24،48،72 تيمار شد و سپس ميزان توان زيستي توسط تست MTT بررسي شد. يافته ها: تست MTT با گرمخانه گذاري 24 ،48 و 72 ساعته سلول هاي HT-29 با تيمار (سوپرناتانت سويه L. paracasei ) نشان داد كه ميزان توان زيستي وابسته به دوز و زمان است و با افزايش غلظت، ميزان توان زيستي نسبت به گروه كنترل كاهش معني دار نشان دادند (05 /0 P). بيشترين تأثير سوپرناتانت مربوط به غلظت20 ميلي گرم/ميلي ليتر در زمان72 ساعت پس از تيمار سلولها بود. نتيجه گيري: نتايج حاصل شده از اين تست حاكي از آن مي باشد كه متابوليتهاي LB12 L. paracasei قادر است رشد سلولهاي آدنوكارسينوماي كولوركتال را به صورت وابسته به دوز و زمان كاهش دهد. به طـوري كـه با افزايش دوز تيمار و زمان اين تاثير افزايش مي يابد.

Introduction and purpose: Intestinal cancer is one of the most important causes of human mortality. For this reason, it is felt to find new materials with natural origin from native bacteria. This study was conducted with the aim of investigating the cytotoxic effect of Lacticaseibacillus paracasei LB12 supernatant on colon cancer cell line (HT-29). Materials and methods: First, L. paracasei strain LB12 was cultured in MRS broth medium. Then it was centrifuged at 5000 rpm for 15 minutes and the supernatant was separated and passed through a 0.22 mm filter. Finally, the supernatant was lyophilized. To investigate the cytotoxic activity, HT-29 cell line was treated with different concentrations of L. paracasei strain supernatant for 24, 48, 72 hours, and then the biological potency was checked by MTT test. Findings: MTT test with 24, 48 and 72 hours incubation of HT-29 cells with treatment (L. paracasei LB12 supernatant) showed that the amount of biological potency is dependent on dose and time and with increasing concentration, the amount of biological potency compared to The control group showed a significant decrease (P 0.05). The greatest effect of the supernatant was related to the concentration of 20 mg/ml in 72 hours after the treatment of the cells. Conclusion: The results obtained from this test indicate that L. paracasei metabolites can reduce the growth of colorectal adenocarcinoma cells in a dose- and time-dependent manner. So that this effect increases with the increase of treatment dose and time.