كنترل رشد سلول هاي رده سرطان پستان در موش هاي مبتلا به سرطان پستان تجربي بوسيله مليتين

Control of the growth of breast cancer cells in mice with experimental breast cancer by Melittin

زمينه و هدف: سرطان يكي از مهم ترين عوامل اصلي مرگ و مير در سراسر جهان است. سرطان پستان شايع ترين سرطان در جهان مي باشد و دومين عامل مرگ و مير ناشي از سرطان در ميان خانم ها است كه ساليانه 1 ميليون مورد جديد از اين بيماري تشخيص داده مي شود. مليتين القاءكننده قوي آپوپتوز و داراي اثرات ضدسرطاني قابل توجهي مي باشد. هدف از اين تحقيق بررسي نقش سازواره ژني حامل ژن كد كننده مليتين بر رشد سلول هاي سرطاني MC4-L2 در موش هاي مبتلا به سرطان پستان تجربي بود. مواد و روش: پلاسميد pcDNA3.1(+)-Melittin كد كننده Melittin، تهيه شد. سپس به منظور تكثير، با روش شوك حرارتي و كلسيم كلرايد وارد باكتري شد و استخراج پلاسميد انجام گرفت. رده سلولي سرطان پستان MC4-L2پس از كشت و شمارش سلولي، به صورت زير جلدي به عضله ران بيست و چهار موش BALB/c تزريق شد. 14 روز پس از تزريق، تومور در ناحيه تزريق شده قابل لمس بود. بعد از 49 روز استخراج RNA و سنتز cDNA انجام گرفت. سپس اندازه‌گيري سطح بيان نسبي ژن‌هاي Bcl2، Bax و IL-6 به روش real-time PCR سنجيده شد. براي بررسي در گروه هاي متفاوت از تست ANOVA و آناليز واريانس متعاقب Tukey s post hoc test استفاده شد (سطح معناداري p 0.05). يافته‌ها: يافته‌هاي اين مطالعه نشان داد كه وكتور نوتركيبpcDNA3.1(+)-Melittin در موش‌هايBALB/c سرطاني شده با رده سلوليMC4-L2 سبب مهار رشد سلول‌هاي سرطان پستاني شد. اين عمل از طريق كنترل ژن‌هاي تنظيم كننده چرخه سلولي و افزايش بيان ژن‌هاي آپوپتوز اوليه و BAX و كاهش بيانBCL-2 انجام شد. همچنين موش‌هايBALB/c تحت تيمار با مليتين، توان بالقوه در تحريك سيستم ايمني با افزايش بيان ژن هاي‌ سيتوكين‌ مانند IL6 شده است. نتيجه گيري: ميلتين با كاهش طول عمر سلول‌هاي سرطان پستان مي تواند سلول هاي سرطاني را مهار مي‌كند. اين ماده همچنين اندازه تومور را كاهش داده و رشد تومور در درون بدن موجود زنده را محدود مي‌كند. مطابق شواهد حاصل، مليتين مي‌تواند به عنوان يك ماده ضد سرطان عمل كند.

Background and objective: Cancer is one of the most important causes of death worldwide. Breast cancer is the most common cancer in the world and it is the second leading cause of cancer deaths among women, with 1 million new cases diagnosed annually. Melittin is a strong inducer of apoptosis and has significant anticancer safety. The purpose of this research was to investigate the role of Melittin coding gene structure on the growth of MC4-L2 cancer cells in mice with experimental breast cancer. Materials and methods: The plasmid pcDNA3.1(+)-Melittin encoding Melittin was prepared. Then, in order to multiply, it was introduced into the bacteria by thermal shock and calcium chloride method, and plasmid extraction was done. MC4-L2 breast cancer cell line was injected subcutaneously into the thigh muscle of twenty-four BALB/c mice after culture and cell counting. 14 days after injection, the tumor was palpable in the injected area. After 49 days, RNA extraction and cDNA synthesis were performed. Then, the relative expression level of Bcl2, Bax and IL-6 genes was measured by real-time PCR method. ANOVA test and Tukey s post hoc test were used to investigate different groups (significance level p 0.05). Results: The findings of this study showed that pcDNA3.1(+)-Melittin recombinant vector inhibited the growth of breast cancer cells in BALB/c mice with MC4-L2 cell line. This operation was done by controlling cell cycle regulatory genes and increasing the expression of early apoptosis genes and BAX and decreasing the expression of BCL-2. Also, BALB/c mice treated with Melittin have the potential to stimulate the immune system by increasing the expression of cytokine genes such as IL6. Conclusion: Melittin can inhibit cancer cells by reducing the lifespan of breast cancer cells. This substance also reduces the size of the tumor and limits the growth of the tumor inside the living organism. According to the evidence, Melittin can act as an anti-cancer agent.