اثرات ژن كد كننده انتروتوكسين H باكتري S. aureus بر بيان ژن هاي Bax، Bcl-2 و Bak در سلول‌هاي رده سرطان كليه ACHN

Investigating the effects of the gene coding for enterotoxin H of Staphylococcus aureus bacteria on the expression of Bax, Bcl-2 and Bak genes in ACHN cells

زمينه و هدف: سرطان كليه به عنوان يكي از 10 سرطان شايع در دنيا شناخته شده است. شايع ترين سرطان كليه در بزرگسالان، كارسينوم سلول هاي كليه است. به طور كلي خطر ابتلا به سرطان كليه با تشخيص و درمان به موقع قابل كنترل و درمان است. استافيلوكوكوس اورئوس فاكتورهاي زيادي را ترشح مي‌كند كه Seh از آن دسته مي باشد. طبق مطالعات انجام شده سم انتروتوكسين H باكتري استافيلوكوكوس اورئوس در سرطان كليه نقش مهمي در القاي آپوپتوز داشته است. هدف مطالعه حاضر، بررسي اثرات ژن كد كننده سم انتروتوكسين H باكتري استافيلوكوكوس اورئوس درسلول هاي ACHN مي‌باشد. مواد و روش ها: سلول‌هايACHN از انستيتو پاستور ايران تهيه شد. سپس در محيط RPMI به همراه 10 درصد سرم جنين گاو كشت داده شدند. توالي ژن سم انتروتوكسين H در وكتور pcDNA3 كلون شد. براي تراريزش سلول ها از روش ليپوفكشن بهره گرفته شد. استخراج RNA انجام شد و تهيه cDNA صورت گرفت. آزمايش real time RT-PCR براي بررسي ميزان بيان ژن هاي مرتبط با آپوپتوز نظيرBAX ، BCL-2 و BAK در سلول هاي گروه آزمايش و گروه شاهد انجام شد . نتايج: نتايج به دست آمده حاكي از افزايش بيان ژن‌هاي BAX و BAK (p˂0.01) و كاهش بيان ژن‌هاي BCL-2 (p˂0.05) در سطح معناداري بوده است. به اين صورت كه در مقايسه با سلول هاي ACHN كه ژن Seh را دريافت نكردند مشخص شد كه سلول هاي داراي ژن، بيشتر به سمت آپوپتوزي پيش رفته بودند. نتيجه گيري: انتروتوكسين H با بيان در سلول هاي سرطان كليه سبب افزايش بيان ژن هاي پروآپوپتوزي و كاهش بيان ژن هاي آنتي آپوپتوزي مي شود. بر طبق شواهد به دست آمده اين سم مي تواند به عنوان يك فاكتور ضد سرطاني در رده ACHN عمل كند.

Background and Target: The Kidney cancer is known as one of the 10 common cancers in the world. The most common Kidney cancer in adults is Kidney cells Carcinome. Generally the hazard of the Kidney cancer infection is both controlable and curable through distinguishing and remedy on time. Staphylococcus aureus secrets a lot of factors that Seh is one of those cathegories. According to accomplished studies, the Enterotoxin poison type H of the S. aureus has a significant role in Kidney cancer in Apoptosis induction. The target of checking effects of Enterotoxin type H poison of S. aureus is placed in ACHN cells. Materials and Methods: ACHN cells have been provided from Institute Pasteur in Iran. Then, they ve been cultured in RPMI environment with %10 FBS. The sequence of Enterotoxin poison type H has been colonized in the pcDNA3 vector. For the discharge of cells, the Lipofection method has been used. Then, the RNA extraction and cDNA providing has done. The real time RT_PCR experiment is accomplished for reviewing an amount of Genes coding about Apoptosis like BAX, BCL-2 and BAK in experimental and control groups. Results: The received results according to increasing of BAX and BAK genes (p˂0.01) coding and decreasing of BCL-2 (p˂0.05) gene coding have been in a meaningful level. Like this that in comparison with ACHN cells that have not received Seh gene has been distinguished that cells with gene have been changed in Apoptosis format. Conclusion: The Enterotoxin type H causes the increasing of gene proapoptosis coding through coding in kidney s cancer cells and decreasing of the Antiapoptosis genes coding. According to received evidences, this poison can work as an anticancer factor in ACHN group.