مروري كوتاه بر جهش زايي هدفمند يا سايت محور

A brief overview of targeted mutagenesis

براي نوشتن اين مقاله مروري 35 مقاله خوانده شد كه از بين آن ها فقط 15 مورد جهت نوشتن مقاله انتخاب شد. در اين مقاله با يك ديد كلي به صورت خلاصه روش تكنيك‌ها، مواد لازم و ابزار‌هاي پايه را جمع‌آوري كرده ايم. اصول پايه در همه آزمايشات مشابه مي باشد اما هدف و روش محققان متفاوت مي باشد. جهش زايي هدفمند يا سايت محور مبتي بر PCR مي باشد كه جهش‌هاي نوكلئوتيدي براي مشخص كردن توالي‌هاي پلاسميدي هستند. اين تكنيك به محقق اجازه مي‌دهد يك اسيد آمينه خاص را بر اساس ويژگي‌هايي همچون ساختار و عملكرد پروتئين آن ها مورد مطالعه قرار بدهند. در اين روش به دليل دسترسي بهتر به توالي‌هاي ژنومي از گونه‌هاي متفاوت به كمك ابزار‌هاي ويرايش ژنومي مي‌توان به مشكلاتي همچون شكستگي‌هاي دو رشته‌اي DNA و الگو‌هاي اهدا‌كننده DNA غلبه كرد. اين در دسترس بودن به تحقيقات پايه مورد نظر يا هدفمند به كمك ابزار PCR كمك بسيار زيادي كرده است. روش SDM يا site‑directed mutagenesis به محققان كمك كرده است كه مكانيسم، فرايند و عملكرد آنزيم‌ها را كشف كنند. در جهش‌هاي عادي تعاملات پروتئين بهم‌زده مي شود. دو روش وجود دارد كه هر كدام از اين روش‌ها چند مرحله دارند. روش دوم بيشتر براي توالي‌هاي بزرگ مانند 13 يا 17 كيلو باز كاربرد دارد. زماني كه ما از PCR براي اين جهش زايي هدفمند استفاده مي كنيم پرايمر طوري طراحي مي شود كه آن ژن كد‌كننده مورد نظر ما را بتوانيم اضافه، حذف يا جايگزين كنيم. نتيجه گيري: براي جهش زايي هدفمند روش هاي متفاوتي مانند SMLP و SDM وجود دارد. اين روش ها براي انواع مختلف پلاسميدها كاربرد دارند. استفاده از روش مناسب به نوع كار محقق بستگي دارد.

To write this review article, 35 articles were read, out of which only 15 were selected to write the article. In this article, with a general view, we have collected the techniques, necessary materials and basic tools. The basic principles are the same in all experiments, but the goal and methods of the researchers are different. Targeted or site-directed mutagenesis is based on PCR, which are nucleotide mutations to specify plasmid sequences. This technique allows the researcher to study a specific amino acid based on features such as their protein structure and function. In this method, problems such as DNA double-strand breaks and DNA donor patterns can be overcome due to better access to genomic sequences from different species with the help of genome editing tools. This availability has greatly aided targeted or targeted basic research using PCR tools. The method of SDM or site-directed mutagenesis has helped researchers to discover the mechanism, process and function of enzymes. In normal mutations, protein interactions are disturbed. There are two methods, each of which has several steps. The second method is more applicable for large sequences such as 13 or 17 kilobases. When we use PCR for this targeted mutagenesis, the primer is designed in such a way that we can add, remove or replace the coding gene we want. Conclusion: There are different methods for targeted mutagenesis such as SMLP and SDM. These methods are used for different types of plasmids. The use of the appropriate method depends on the type of researcher s work.