بررسي خصوصيات كمپلكس هاي آنزيمي سلوليتيك از موتانت هاي پرتو گاما قارچ Trichoderma reesei

قارچ Trichoderma reesei یكی از ارگانیسمهای مهم تولیدكننده آنزیم های تجزیه كننده سلولز در طبیعت است. در این پژوهش 21 جدایه موتانت پرتو گاما قارچ T. reesei برای تولید آنزیم سلولاز در شرایط دمایی °C 28 و سرعت همزدن rpm 181 برای مدت 72 ساعت و سلولز كلوئیدی به عنوان سوبسترا تولید گردید. غلظت پروتئین های خارج سلولی T. reesei و موتانت های آن با استفاده از روش بردفورد اندازه گیری شد. آویسل، كربوكسی متیل سلولز و كاغذ صافی واتمن # 1 برای اندازه گیری فعالیت آنزیم سلولاز استفاده شد. همچنین خلوص و تركیب پروتئین های غنی از آنزیم با استفاده از آزمون SDS-PAGE مورد ارزیابی قرار گرفت. بالاترین میزان تولید پروتئین خارج سلولی در جدایه های T. r M7 و T. r M17 مشاهده شد. فعالیت آنزیم های اندوگلوكاناز، اگزوگلوكاناز و سلولاز كل در جدایه موتانت T. r M8 بالاترین مقادیر فعالیت آنزیمی را در بین جدایه های موتانت و جدایه والد اولیه نشان داد. سلولاز كل شامل فعالیت آنزیم های اندوگلوكاناز، اگزوگلوكاناز و بتا گلوكوزیداز می شود كه - بصورت سینرژیستی باعق هیدرولیز سلولز كریستالی می شوند. اختلاف وزن مولكولی باند های آنزیم های نشان داد كه آنزیم های EG IV ، Cel 1A ، Cel 12A ، Cel 45A ، Cel 3A ، Cel 7A ، Cel 6A ، Cel 5A و Cel 61A سلولز كلوئیدی را بصورت سینرژیستی هیدرولیز می كنند. این نتایج اولیه پیشنهاد می كند كه موتاسیون پرتو گاما برای جداسازی موتانت های با تولید بالای آنزیم سلولاز قارچ تریكودرما استفاده قابل توجهی در توسعه گونه های سلولیتیك تجاری خواهد داشت.