تاژك CS 3 اشريشيا كلي، يك سيستم مناسب براي نمايش سطحي پپتيد ها در سطح باكتري با كاربردهاي زيست فناوري

نمايش سطحي باكتريائي يك ابزار قدرتمند براي استقرار پروتئين ها و پپتيدهاي بيگانه در سطح باكتريها با كاربردهاي متعدد در حوزه زيست فناوري است. سيستم هاي نمايش سطحي باكتريائي متعددي بر پايه پروتئينهاي غشاء خارجي، تاژك (پيلي)، تاژه و... باكتريها توسعه داده شده است. تاژكها مزاياي خاصي نسبت به ساير مولكولهاي حامل دارند. اين اجزاء سطح سلولي از صدها زير واحد يكسان تشكيل شده اند كه به تعداد زياد روي كل سطح باكتري قرار گرفته و به سهولت در تماس با محيط هستند. در نتيجه، يك شاخص آنتي ژنيك خارجي وارد شده در تاژك اين امكان را پيدا مي كند كه در طول تاژك در محل مناسب بطور مكرر قرار گرفته و در كل سطح سلول ابراز (مستقر) شود. اشريشيا كلي مولد انتروتوكسين يك حامل مناسب براي ابراز و نمايش اپي توپهاي بيگانه در CS تاژك 3 از رشته هاي نازك قابل انعطاف با قطر حدود 2 نانومتر تشكيل شده است. CS سطح سلول باكتريائي است. 3 به آن توان پذيرش پپتيدهاي خارجي در محلهاي مجاز در معرض محيط خارجي بدون از CS خصوصيات پيلي 3 دست دادن عملكردش را مي دهد. بنابراين اين پيلي مي تواند بعنوان يك حامل مناسب باقوه براي ساخت پيلي هيبريد در جهت اهداف توسعه واكسن و جاذب فلزات سنگين در نظر گرفته شود. براي وارد كردن پپتيد (CstH) براي اين منظور، ابتدا لازم است مناسب ترين نقاط پروتئين سازنده پيلي خارجي بدوت تداخل با ساخت و عملكرد پيلي تعيين شود كه مستلزم تعيين خصوصيات مناطق در معرض سطح شامل پيش گوئي ساختمان دوم پروتئين، احتمال بيان CS است. مطالعات نرم افزاري زير واحد اصلي تاژك 3 CS3 به صورت اينكلوژن بادي، آبدوستي پروتئين و قرار گيري در معرض حلال توسط برنامه ها و نرم افزارهاي مربوطه انجام شد. پنج نقطه با آبدوستي بالا و ساختارهاي لوپ، پيچه ،CstH با تعيين مناطق در معرض و ساختمان دوم و خم بعنوان نقاط مجاز ورود اپي توپهاي خارجي در نظر گرفته شد. در بررسي تجربي اپي توپهاي خطي از (coil) روتاويروس، پپتيدهاي كوتاه NSP سم حساس به حرارت اشريشيا كلي، گليكوپروتئين غير ساختماني 4 B زير واحد غني از هيستيدين و سيستئين متصل شونده به فلزات سنگين و توالي رمز كننده سم مقاوم به حرارت اشريشيا كلي (اپي توپ ساختاري) وارد اين مناطق شد. توسط وسترن بلات و ميكروسكوپ E. coli K توانائي پيلي هيبريد در بيان و استقرار در سطح 12 در سطح سالمونلا تيفي CS3::LTBepitop و CS3::ST ايمونوفلورسانس نشان داده شد. پيلي هاي هيبريد موريوم نيز بيان شدند. بررسي سرم و مخاط روده موشهاي ايمن شده با سويه واكسن سالمونلاي بيان كننده پيلي بود. CS و 3 LTB, ST بر عليه IgA و IgG نشان دهنده حضور آنتي باديهاي ELIZA هاي هيبريد فوق توسط توسط اين E. coli روتاويروس