بررسي مقايسه اي تست هاي بيوشيميايي و PCR در تشخيص آلودگي هاي مايكوپلاسمايي ترشحات دستگاه تناسلي زنان و مردان نابارور

Comparative Study of Biochemical and PCR Tests in the Detection of Mycoplasma Contaminations of Genital Secretions of Infertile Women and Men

مقدمه مايكوپلاسماها از مهم ترين آلوده كنندگان اصلي كشت سلولي محسوب مي شوند. مايكوپلاسما هومينيس يكي از مهم ترين مايكوپلاسماهاي انساني است كه در ارتباط با عفونت هاي مختلف در دستگاه ادراري تناسلي زنان و مردان ميباشد. هدف از اين مطالعه مقايسه روش هاي تشخيص آلودگي هاي مايكوپلاسمايي ترشحات دستگاه تناسلي زنان و مردان نابارور مراجعه كننده به مركز ناباروري كرمان مي باشد. مواد و روش ها: اين مطالعه به صورت توصيفي- مقطعي بر روي 100 زن و 100 مرد نابارور مراجعه كننده به مركز ناباروري كرمان در طي 6 ماه انجام گرديد. نمونه هايي كه در محيط PPLO Broth به آزمايشگاه ارسال شدند از فيلترهاي 0/45 ميكرومتر عبور و طبق دستورالعمل، در محيط هاي اختصاصي مايع و جامد PPLO كشت و در دماي 37 درجه سانتي گراد و در مجاورت انكوباتور Co2 دار نگهداري شدند. پس از استخراج DNA با استفاده از روش PCR و به كمك پرايمرهاي اختصاصي جنس مايكوپلاسما و گونه مايكوپلاسما هومينيس موردبررسي قرار گرفت. يافته هاي پژوهش: از مجموع 200 نمونه بررسي شده با روش كشت 17/5 درصد كلني مايكوپلاسما مثبت و با استفاده از تستهاي بيوشيميايي 6 درصد مايكوپلاسما هومينيس بودند و با روش PCR 44 درصد نمونه ها آلوده به جنس مايكوپلاسما و 16/5 درصد آلوده به گونه مايكوپلاسما هومينيس بودند. بحث و نتيجه گيري: نتايج حاصل از اين مطالعه نشان مي دهد كه PCR يك روش حساس و سريع براي تشخيص مايكوپلاسما هومينيس در نمونه هاي زنان و مردان نابارور است.

Introduction: Mycoplasma are from cell culture the main polluters. Mycoplasma hominis is one of the most important human mycoplasmas are associated with infections of the genitourinary system in women and men. The aim of this study compare methods of detection of mycoplasma contamination in the genital secretions of men and women referring to infertility center is Kerman. Materials and Methods: This descriptive cross-sectional study was performed on 100 women and 100 infertile men referred to Kerman Infertility Center during 6 months. Samples that were sent to the laboratory in the PPLO Broth filter 0.45 micrometers were passed and in accordance with the instructions, they were cultured in PPLO solid liquid and solid media and stored at 37 ° C, Co2 incubator. After the extraction of DNA by using PCR method and especial primers, the species and genus of Mycoplasma hominis were determined and studied. Findings: Of the 200 samples examined by culture method, 17.5% of mycoplasma colonies were positive and using biochemical tests were mycoplasma hominis 6%. By PCR method, 44% of samples were infected with mycoplasma and 16.5% contaminated they were mycoplasma hominis. Discussion & Conclusion: The results of this study show that PCR is a sensitive and rapid method for detecting Mycoplasma huminis in infertile women and men.