فراواني ژن هاي blaCTX-M، blaTEM وblaSHV در ايزوله هاي سيتروباكتر جداشده از بيمارستان امام رضا (ع) در كرمانشاه

Frequency Of blaCTX-M, blaTEM and blaSHV Genes in Citrobacters Isolated from Imam Reza Hospital in Kermanshah

سابقه و هدف: گونه‌هاي سيتروباكتر عفونت‌هاي فرصت طلب بيمارستاني ايجاد مي‌كنند و به دنبال كسب بتالاكتامازهاي دامنه گسترده (ESBL) درمان آن ها مشكل ساز شده است. هدف از اين مطالعه بررسي فراواني ژن هاي ESBL در ايزوله‌هاي سيتروباكتر در بزرگ ترين بيمارستان شهر كرمانشاه (امام رضا) در سال 1392-1393 بود. مواد و روش‌ها: مطالعه حاضر از نوع توصيفي- تحليلي بود. در اين مطالعه 70 جدايه سيتروباكتر از نمونه‌هاي باليني جمع‌آوري شد و به وسيله تست‌هاي استاندارد باكتري‌شناسي و كيت API 20E تاييد شدند. پس از سنجش حساسيت آنتي‌بيوتيكي به روش انتشار ديسك، وجود آنزيم‌هاي ESBL از نظر فنوتيپي به روش آزمايش ديسك تركيبي مشخص شد. از پرايمرهاي اختصاصي جهت تعيين ژن‌هاي blaCTX-M ، blaTEM و blaSHV در ميان جدايه‌ها در آزمايش PCR استفاده شد. داده‌ها توسط نر‌م‌افزارSPSS نسخه 18 و آزمون فيشر و كاي اسكوير (Chi-Square) مورد تجزيه و تحليل قرار گرفت. يافته‌ها: از 70 جدايه سيتروباكتر، 5 (7/1 درصد) جدايه از نظر فنوتيپي براي توليد آنزيم‌هاي بتالاكتاماز دامنه گسترده مثبت شدند. آزمايش PCR نشان داد از نظر ژنوتيپي 19 ايزوله (31/6 درصد) ESBL مثبت شدند و فراواني ژن‌هاي blaCTX-M، blaTEM و blaSHV به ترتيب 21/3 درصد، 11/4 درصد و 1/4 درصد بود. بيش‌ترين مقاومت آنتي‌بيوتيكي به سفازولين (84/8 درصد)، آمپي‌سيلين (71/2 درصد) و كوتريموكسازول (36/4 درصد) و كم‌ترين مقاومت نسبت به جنتامايسين (9/1 درصد)، پيپراسيلين/تازوباكتام (4/5 درصد) و ايمي‌پنم (1/5 درصد) بود. استنتاج: نتايج نشان داد كه سيتروباكتر فروندي گونه غالب در ايجاد عفونت‌هاي بيمارستاني در كرمانشاه مي‌باشد. فراواني كلي جدايه‌هاي سيتروباكتر داراي ژن‌هاي ESBL بالا است و در اين ميان ژن blaCTX-M داراي بيش‌ترين شيوع نسبي مي‌باشد. بين فراواني فنوتيپي و ژنوتيپي ESBL در ايزوله‌هاي سيتروباكتر اختلاف زيادي وجود داشت كه ممكن است نشانگر عدم بيان بالاي ژن‌هاي ESBL در ايزوله سيتروباكتر باشد.

Background and purpose: Citrobacter species can cause opportunistic hospital-acquired infections and their treatment has become problematic following the acquisition of extended spectrum beta- lactamases (ESBLs). The purpose of this study was to determine the frequency of ESBL genes in clinical isolates in Kermanshah Imam Reza Hospital. Materials and methods: In this study, 70 Citrobacter isolates were collected from various clinical specimens and confirmed by standard bacteriological tests and API20E Kit. After antibiotic susceptibility testing using disk diffusion method, the presence of ESBL phenotype was determined by combined disk test. Specific primers were used to detect blaCTX-M, blaTEM and blaSHV genes among isolates using PCR. Data was analyzed in SPSS V.18 applying Chi-Square test and Fisher's exact test. Results: From 70 isolates of Citrobacter, 5 (7.1%) were phenotypically positive for ESBL. The PCR test determined 19 isolates (31.6%) genetically positive for ESBL, and the frequency of blaCTX-M, blaTEM and blaSHV genes were 21.3%, 11.4% and 1.4%, respectively. The highest antibiotic resistance of isolates was to cefazolin (84.8%), ampicillin (71.2%) and co-trimoxazole (36.4%), and the lowest was to gentamicin (9.1%), piperacillin/tazobactam (4.5%), and imipenem (1.5%). Conclusion: The results showed that Citrobacter freundiii was the dominant species for hospital-acquired infections in Kermanshah. A high percentage of isolates contained ESBL genes and blaCTX-M was the most common. There was a high gap between the frequencies of genotypic and phenotypic for ESBL, which may indicate ESB genes are not highly expressed in Citrobacter isolates.