بررسي ميزان بيان microRNA-146a در پوليپ هاي آدنوماتوز و سرطان كولوركتال

The Expression of MicroRNA-146a in Adenomatous Polyps and Colorectal Cancer

سابقه و هدف: سرطان كولوركتال يكي از متداول‌ ترين انواع سرطان است. در طي 25 سال گذشته، بروز اين سرطان در ايران افزايش يافته است اخيراً ميكرو RNA ها نگرش جديدي را در تحقيقات سرطان ايجاد كرده اند. نقش‌هاي مختلف microRNA-146a در تومورهاي مختلف مشخص شده است. هـدف از ايـن مطالعـه بررسـي ميزان بيان miR-146a در بافت تومور آدنوكارسينوم كولوركتال و مراحل مختلف سرطان كولوركتال با استفاده از روش Real Time PCR بوده است. مواد و روش‌ها: در مطالعه تجربي حاضر تعداد 70 بلوك پارافيني (50 بيمار و20 فرد سالم) طي سال‌هاي 91 تا 93 در بيمارستان فيروزگر تهران مورد بررسي قرار گرفت. مقدار كل RNA هاي موجود در بافت‌ها دپارافينه شده و با استفاده از كيت استخراج RNA، استخراج و غلظت RNA توسط دستگاه نانو دراپ اندازه‌گيري شد. miR-146a توسط qRT_PCR از كل RNA استخراج شد. ميزان بيان ژن miR-146a با استفاده از دستگاه لايت سايكلر بررسي و توسط روش 2-∆∆CT اندازه‌گيري شد و با استفاده از نرم‌افزار SPSS ورژن 19 و آزمون ANOVA و T-test زوجي مورد تحليل آماري قرار گرفت. يافته‌ها: در ميزان بيان miR-146a پوليپ‌هاي آدنوماتوز و بافت توموري سرطان كولوركتال (stage I-IV) نسبت به بافت نرمال كولوركتال تفاوت معني‌داري وجود داشت (P<0.05) كه اين تفاوت با افزايش ميزان بيان miR-146a همراه بوده است. استنتاج: افزايش ميزان بيان miR-146a با ميزان پيشرفت سرطان در مراحل پيش سرطاني (آدنوكارسينوم) و سرطان در مراحل ابتدايي و پيشرفته ارتباط مستقيم دارد.

Background and purpose: Colorectal cancer (CRC) is one of the most common types of cancer. Its incidence has increased in Iran during the last 25 years. Micro-RNAs are used as new approach in cancer researches. The roles of miR-146a have been detected in different tumors. This study aimed at investigating the expression of microRNA146 in tumor tissue of colorectal adenocarcinoma in various stages of colorectal cancer using Real Time PCR. Materials and methods: In this experimental study, 70 paraffin blocks from 50 patients and 20 healthy individuals (during 2012-2014) were studied. The total amount of RNA in tissues was deparaffinized using RNA extraction kit and the RNA concentration was measured by NanoDrop®. miR- 146a from total RNA was extracted by qRT_PCR. The expression of miR-146a gene was studied by light cycler and 2-ΔΔCT was applied to measure the gene expression. Data was analyzed using ANOVA and paired t-test. Results: Significant differences were seen in expression of mir-146a in adenomatous polyps and colorectal cancer tumors (stage I-IV) compared with those of the healthy tissues (P<0.05) which were associated with increase in mir-146a expression. Conclusion: Increase in the expression of mir-146a is directly associated with development of cancer in pre-cancer (adenocarcinoma) and advanced cancer.