بررسي تاثير عصاره هاي متانولي گياه Avicennia marina بر رشد و تكثير لنفوسيت و جهش زايي آن ها با استفاده از آزمون ايمز و روش هاي بيوانفورماتيكي

Activity of Avicennia marina Methanol Extracts on Proliferation of Lymphocytes and their Mutagenicity Using Ames Test and In Silico Method

سابقه و هدف: گياه حرا با نام علمي Avicennia marina متعلق به خانواده آكانتاسه مي‌باشد كه در گذشته براي درمان بيماري‌هاي مختلفي نظير زخم معده، آبله، روماتيسم و سوختگي‌ها به كار مي‌رفته است و در سال‌هاي اخير اثرات مطلوب درماني آن در بررسي‌هاي متعددي به اثبات رسيده است. هدف از اين پژوهش بررسي تاثير عصاره متانولي اندام‌هاي مختلف اين گياه بر تكثير لنفوسيت‌هاي انساني و پتانسيل جهش زايي آن در شرايط in vitro و in silico مي‌باشد. مواد و روش‌ها: دراين بررسي تجربي، نمونه‌هاي مورد نظر پس ازجمع‌آوري، خشك و آسياب شدند. سپس عصاره‌هاي متانولي تهيه شده از بخش‌هاي مختلف گياه با روش غوطه‌ ور سازي، به وسيله روتاري در دماي 40 درجه سانتي‌گراد تغليظ و با استفاده از PBS استريل به غلظت‌هاي 50، 100، 500، 1000 و 1500 ميكروگرم بر ميلي‌ليتر رقيق گرديد. تاثير عصاره‌هاي ذكر شده بر رشد و تكثير سلول‌هاي تك هسته‌اي خون محيطي با آزمون MTT و قابليت جهش‌زايي آن با استفاده از آزمون ايمز بررسي شد. هم چنين پيش بيني جهش‌زايي 15 تركيب غالب اين گياه با نرم افزار Toxtree2.6.6 انجام گرديد. يافته‌ها: نتايج اين مطالعه نشان داد از بين عصاره‌هاي بخش‌هاي مختلف گياه حرا، برگ و ريشه به ترتيب بيش‌ترين و كم‌ترين اثر تحريك كنندگي بر رشد و تكثير لنفوسيت‌ها دارند. هم‌چنين برگ و ساقه گياه حرا فاقد پتانسيل جهش‌زايي در غلظت‌هاي مختلف مي‌باشند. نتايج حاصل از پيش‌بيني جهش‌زايي 15 تركيب گياه حرا نشان داد 4 تري ترپنوئيد تارا كسرول، بتولين، گوزيپول و لوپئول در سطح ضعيف جهش‌زايي قرار مي‌گيرند. استنتاج: با توجه به اثرات مطلوب عصاره متانولي برگ و ساقه گياه حرا بر تكثير و رشد لنفوسيت‌ها و عدم جهش‌زايي آن‌ها مي‌توان نتيجه گرفت كه برگ و ساقه اين گياه مي‌تواند كانديد مناسبي جهت بررسي‌هاي بيش‌تر براي ساخت داروهايي با منشا گياهي در درمان بيماري‌هاي نقص ايمني باشد.

Background and purpose: Avicennia marina (family Acanthaceae) has been used as traditional medicine in Iran to treat some diseases such as ulcers, rheumatism and burns. The present study investigated the in silico and in vitro mutagenicity of the fruit, leaf, seed and stem extracts of Avicennia marina and their effects on human peripheral blood mononuclear cells (PBMC) proliferation. Materials and methods: In this experimental study, air dried and powdered plant materials were extracted by methanol using maceration. The extracts were evaporated to dryness by rotary evaporator at 40°C and were diluted using different PBS concentrations (50, 100, 500, 1000, and 1500 μg/ml). The effect of the methanol extract of this plant on lymphocyte proliferation was measured using MTT assay. The mutagenicity of these extracts was also investigated using Ames test. In silico analysis of 15 dominant compounds of the plant was performed by Toxtree 2.6.6 software. Results: The methanol extracts of the leaf and root had the highest and lowest inducing effect on lymphocyte proliferation, respectively. Leaf and stem extracts of Avicennia marina did not show any mutagenicity on this strain. In silico analysis demonstrated that among 15 compounds, four triterpenoids (Taraxerol, Betulin, Lupeol, and Gossypol) had weak mutagenicity. Conclusion: Avicennia marina showed positive effects on proliferation of lymphocytes and their mutagenicity, therefore, it could be considered as a good candidate in treatment of immunodeficiency diseases