ارتباط بين جهش هاي ژن ERG11 و مقاومت به فلوكونازول در سويه هاي كانديدا آلبيكنس جدا شده از رشت در ‌سال هاي 95-94

Correlation between ERG11 gene mutations and fluconazole resistance in Candida albicans strains isolates isolated in from Rasht in 2015-2016 years

زمينه و هدف: كانديدا آلبيكنس به عنوان يك پاتوژن قارچي فرصت طلب در انسان باعث كانديديازيز مي شود. مصرف گسترده آزول ها باعث افزايش مقاومت به آزول ها در جدايه هاي كانديدا آلبيكنس شده است. جهش در ژن ERG11 يكي از چندين علت مقاومت به آزول ها در كانديدا آلبيكنس مي باشد. هدف از اين مطالعه، يافتن جهش هاي ژن ERG11 در جدايه هاي مقاوم به فلوكونازول در رشت بود. مواد و روش ها: جدايه­هاي كانديدا آلبيكنس با استفاده از روش هاي استاندارد تعيين هويت چون لوله زايا شناسايي شدند. مقاومت و حساسيت جدايه ها به فلوكونازول به كمك روش هاي ديسك ديفيوژن و MIC مورد ارزيابي قرار گرفت. براي تعيين جهش، ژن ERG11 در جدايه هاي كلينيكي به روش PCR تكثير و سپس تعيين توالي شد. يافته ها: از 23 جدايه كانديدا آلبيكنس، 20 جدايه به فلوكونازول مقاوم بودند.MICي فلوكونازول در اين جدايه ها بين 128 تا 2048 ميكروگرم بر ميلي ليتر تعيين گرديد. هم­چنين تحليل تعيين توالي نشان داد كه 10 جدايه مقاوم به فلوكونازول دو جهش بدمعني (D116E و E266D) در ژن ERG11 داشتند. نتيجه گيري: در اين مطالعه، مقاومت به غلظت بالاي فلوكونازول نشان مي دهد كه مكانيسم هاي مختلفي به طور همزمان در ايجاد مقاومت به آزول ها در اين جدايه ها نقش دارند. همراهي جهش در ژن ERG11 و تغيير بيان ديگر ژن ها ممكن است باعث مقاومت به غلظت بالاي فلوكونازول در اين مطالعه شده باشد.

Background: Candida albicans as an opportunistic fungal pathogen in human causes candidiasis. The widespread use of azoles has led to the increase of azole resistance in Candida albicans isolates. Mutation in the ERG11 gene is one of several azole resistance reasons in Candida albicans. The aim of this study was to find ERG11 gene mutations in fluconazole resistant isolates in Rasht. Materials and methods: Candida albicans isolates were identified by standard identification methods such as germ tubes. The fluconazole resistance and susceptibility of the isolates was evaluated by Disc diffusion and MIC methods. For mutation determining, ERG11 gene was amplified by PCR and then sequenced in clinical isolates. Results: From 23 isolates of Candida albicans, 20 isolates were fluconazole resistant. The MIC of fluconazole in these isolates was determined between 128 to 2048µg/ml. Also, sequencing analysis showed that 10 fluconazole resistant isolates had two missense mutations (D116E and E266D) in ERG11 gene. Conclusion: In this study, resistance to high concentration of fluconazole shows that different mechanisms simultaneously implicated in developing azoles resistance in the isolates. Association of ERG11 gene mutation and deregulation of other genes can be led to resistance to high fluconazole concentration in this study.