اثرIgY ايجاد شده بوسيله DNA واكسن عليه اوره آز C در موش هاي آلوده به هليكوباكتر پيلوري

The Effect of DNA Vaccine Induced IgY Against C-Urease in Mice Infected with Helicobacter Pylori

زمينه و اهداف: هليكوباكتر پيلوري يك باكتري گرم منفي مارپيچي شكل مي باشد كه با استقرار و تكثير در لايه مخاطي معده انسان ايجاد عفونت مي نمايد. اين عفونت مي تواند منجر به التهاب مزمن، زخم هاي معده و دوازدهه گردد. تحقيق براي يافتن روش هاي جديد درمان به سبب ايجاد مقاومت روز افزون باكتري به آنتي بيوتيك ها گسترده تر مي شود. هدف از مطالعه حاضر بررسي اثرIgY توليد شده بوسيله DNA واكسن حاوي ژن بيان كننده زير واحد UreC از آنزيم اوره آز هليكوباكتر پيلوري در موش هاي آلوده شده با باكتري هليكوباكتر پيلوري مي باشد. مواد و روش ها: تعداد 109 باكتري (در µl 400 محيط كشت بروسلا براث) به معده موش هاي C57BL/6j، 3 بار به فاصله يك روز در ميان گاواج شد. به موش هاي شاهد نيز µl 400 محيط كشت استريل خورانده شد. هشت هفته پس از آخرين تلقيح از موشها خونگيري شد و ميزان آلودگي بوسيله ELISA ارزيابي گرديد. شدت التهاب معده توسط تست پاتولوژيكي بررسي شد. موش هاي آلوده به مدت 28 روز توسط mg 60 IgY جدا شده از زرده تخم مرغ از مرغ هاي ايمن شده بوسيله واكسن DNA اي مورد تيمار قرار گرفتند. يافته ها: نتايج ELISA نشان دهنده ايجاد آلودگي موش ها به ميزان 53% بود. نتايج پاتولوژي وجود التهاب در معده موش هاي آلوده را تاييد كرد. كاهش معني داري در تيتر آنتي بادي موش هاي آلوده و تيمار شده با IgY در مقايسه با موش هاي آلوده و تيمار نشده، ديده شد. نتيجه گيري: نتايج نشان داد كه IgY توليد شده مي تواند در كاهش التهاب در مدل موشي موثر باشد.

Background and Objectives: Helicobacter pylori is a gram negative, spiral bacterium that colonizes and infects human gastric mucosal. Infection by these bacteria causes chronic inflammation of stomach leading to stomach and duodenum ulcers. Aim of the present research is to study the effect of IgY purified from eggs yolk of immunized with DNA vaccine of C-urease, a subunit of urease enzyme, in treatment of mice infected with H. pylori. Materials and Methods: Inoculums of 109 bacteria in 400µl Brocella broth medium were gavaged into C57BL/6j mice in an alternate day method in a six day period. 400 µl of Brocella broth medium was given to the control mice. Eight weeks after the last inoculation, blood was taken from the mice, and infection rate was analyzed using indirect ELISA method. Severity of inflammation was analyzed by pathological tests. Infected mice were orally treated for 28 days with 60 mg of IgY isolated from hens immunized with DNA vaccine. Results: ELISA results showed establishment of infection in 53% of the infected mice. Pathological results, confirmed the inflammation in the infected subjects. Significant difference in antibody titer of serum was observed between infected mice treated with IgY and the positive control group. Conclusion: This study showed that C-urease induced IgY is successful in inhibition of H-Pylori infection in mice model.