بررسي اثر نانوذرات ميسلي حاوي كوركومين بر جدايه هاي سودوموناس آئروژينوزاي مقاوم به سيپروفلوكساسين و بر بيان ژن هاي mexC و mexD

Investigation the Effect of Micelle Nanoparticles Containing Curcumin on Ciprofloxacin Resistant Isolates of Pseudomonas Aeruginosa and on mexC and mexD Genes Expression

زمينه و هدف: سودوموناس آئروژينوزا يك باكتري گرم منفي و فرصت طلب است كه علت اصلي عفونت‌هاي بيمارستاني مانند سوختگي شديد مي‌باشد. كوركومين جزء اصلي گياه زردچوبه (Curcuma longa)است كه داراي اثرات ضد سرطاني و ضد التهابي است. هدف از اين مطالعه ارزيابي اثر ضد باكتريايي كوركومين در سودوموناس آئروژينوزا از طريق بيان mexC و mexD بود. مواد و روش­‌ها: در اين مطالعه توصيفي-تحليلي، سويه‌هاي سودوموناس آئروژينوزا از بيمارستان‌ها و آزمايشگاه‌هاي استان گيلان تهيه شد. پس از تست آنتي‌بيوگرام و آزمايش MIC، چهار جدايه مقاوم به سيپروفلوكساسين با استفاده از سيپروفلوكساسين به تنهايي (MIC2/1) (نمونه كنترل) و در تركيب با كوركومين انكپسوله در نانوذرات ميسلي (نمونه تست) تيمار شدند. پس از 24 ساعت، استخراج RNA و سنتز cDNA انجام شد. سپس بيان ژن‌هاي mexC وmexD با استفاده از روش Real-Time PCR در سلول‌هاي تحت تيمار با كوركومين و بدون تيمار مورد ارزيابي قرار گرفت. يافته ‌ها: اين مطالعه نشان داد كه تركيب سيپروفلوكساسين (MIC2/1) با كوركومين انكپسوله در نانوذرات ميسلي باعث مهار رشد تقريباً 50 درصدي در سودوموناس آئروژينوزا مي­شود. در سلول‌هاي تيمار شده با كوركومين و سيپروفلوكساسين در مقايسه با سلول‌هاي تيمار شده با سيپروفلوكساسين به تنهايي، ژن‌هاي mexCو mexD به ميزان 65/0< و 1/0< به ترتيب در سه جدايه و چهار جدايه كاهش بيان معني دار (05/0> p) داشتند.نتيجه­گيري: نتايج ما نشان داد كه كوركومين انكپسوله در نانوذرات ميسلي همراه با غلظت MIC2/1 سيپروفلوكساسين موجب مهار رشد سودوموناس آئروژينوزا از طريق كاهش بيان ژن‌هاي mexC و mexD مي‌شود.

Background: Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic gram-negative bacterium that is a major cause of nosocomial infections such as severe burns. Curcumin is the main component of turmeric (Curcuma longa) that has anti-cancer and anti-inflammatory effects. The aim of this study was to evaluate antibacterial effect of curcumin in ciprofloxacin resistant isolates of Pseudomonas aeruginosa through mexC and mexD gene expression.Materials and Methods: In this descriptive-analytical study, Pseudomonas aeruginosa strains were obtained from hospitals and laboratories in Guilan province. After disc difusion and MIC tests, four ciprofloxacin resistant strains of Pseudomonas aeruginosa were treated by ciprofloxacin (1/2MIC) only (control sample) and in the combination with curcumin encapsulated in micelle nanoparticles (test sample). After 24h, RNA extraction and cDNA synthesis was performed. Then, the expression of mexC and mexD genes was evaluated quantitatively by Real-time PCR method in curcumin treated and un-treated cells Results: This study showed that combination of ciprofloxacin (1/2 MIC) with curcumin encapsulated in micelle nanoparticles led to approximately 50% of growth inhibition in Pseudomonas aeruginosa. In treated cells with curcumin and ciprofloxacin compared to treated cells with ciprofloxacin alone, mexC and mexD genes were significantly (p<0.05) downregulated >0.65 fold in three isolates and >0.1 fold in four isolates, respectively.Conclusion: Our results suggested that curcumin encapsulated in micelle nanoparticles combined with 1/2 MIC value of ciprofloxacin inhibits the growth of Pseudomonas aeruginosa through reducing mexC and mexD expression.