مقايسه اثر ضدويروسي عصاره‌هاي متانولي و هگزاني گياه ماميران (Chelidonium majus L.) بر ويروس هرپس سيمپلكس تيپ يك مقاوم به آسيكلووير

Comparison of Antiviral Effects of Methanol and Hexane Extracts of Chelidonium Majus L. Against Acyclovir Resistant Herpes Simplex Type 1

زمينه و هدف: ويروس هرپس سيمپلكس تيپ يك (HSV-1) قادر به ايجاد تبخال­هاي دهاني، آنسفاليت و كراتوكونژنكتيويت است. امروزه، به دليل افزايش جهاني شيوع عفونت­هاي ناشي از HSV-1 و ايجاد مقاومت دارويي، يافتن تركيبات ضد ويروسي جديد از مواد طبيعي مورد توجه قرار گرفته است. در اين پژوهش، اثر ضد ويروسي عصاره­هاي هگزاني و متانولي گياه ماميران عليه HSV-1 مقاوم به آسيكلووير در كشت سلولي بررسي شد.مواد و روش ­ها: ميزان سميت عصاره­هاي هگزاني و متانولي گياه ماميران براي سلول HeLa با دو روش تريپان بلو و MTT مشخص شد. اثرات ضد ويروسي عصاره­ها بر روي ويروس به صورت مستقيم بررسي شد. اثر ضد ويروسي اين عصاره­ها در غلظت­هاي مختلف و هم­چنين در ساعات مختلف بررسي شد. در هر مرحله تيتر ويروس با روش 50 درصد دوز عفوني كننده كشت سلول (TCID50) تعيين گرديد.يافته­ ها: غلظت 200 ميكروگرم در ميلي­ليتر عصاره متانولي و 600 ميكروگرم در ميلي­ليتر عصاره هگزاني به عنوان حداقل غلظت سيتوتوكسيك موثر انتخاب شدند. اين غلظت از عصاره‌ها اثر خارج سلولي بر ويروس نداشتند. غلظت 200 ميكروگرم در ميلي­ليتر عصاره متانولي بيشترين اثر مهاري را در زمان­هاي 1 و 2 ساعت پس از جذب ويروس نشان داد، به طوري كه مقدار ويروس راlog10 TCID50 4 نسبت به كنترل كاهش داد. عصاره هگزاني فاقد اثر ضد ويروسي بود. نتيجه­ گيري: عصاره متانولي گياه ماميران در مقايسه با عصاره هگزاني اثر ضد ويروسي معني‌داري بر روي HSV-1 مقاوم به آسيكلووير نشان داد. براي شناسايي تركيبات فعال اين گياه و استفاده از آن‌ها در داروهاي ضدويروسي پژوهش­ هاي بيشتري لازم است.

Background and Aim: Herpes simplex virus type 1 (HSV-1) may lead to oral herpes, encephalitis and keratoconjunctivitis. Today, following the increasing of HSV-1 prevalence and drug resistance, there has been an interest in the use of natural substance. In this study, we assessed the effect of hexane and methanol extracts of Chelidonium majus L. against acyclovir-resistant HSV-1. Materials and Methods: The toxicity threshold of Chelidonium majus L. hexane and methanol extracts on HeLa cell was determined with trypan blue and MTT methods. Their direct antiviral effects were evaluated against HSV-1. Different concentrations of extracts in different times of virus replication have been evaluated. In each stage, the viral titers were tested by TCID50 assay. Findings: The methanol extract at the concentration of 200 µg/ml and hexane extract at the concentration of 600 µg/ml were determined as effective minimal cytotoxic concentration on HeLa cell line. These concentrations did not have significant virucidal effects on Herpes simplex virus. The maximum antiviral effects of methanol extract at the concentration of 200 µg/ml was exhibited 1 and 2 hours after virus adsorption and reduced virus titer 4 logTCID50 compared to the control. Hexane extract did not have antiviral effect. Conclusion: methanol extract of chelidonium majus L. compared to hexane extract showed significant antiviral effect on acyclovir-resistant HSV-1. Further research is required to identify specific bioactive compounds of this plant in order to be used in anti-herpes drugs.