بررسي بافتي و مولكولي و اثر سينرژيسم نانو ذرات مس با آنتي بيوتيك بر تومورهاي سرطان كولوركتال آلوده به كلبسيلا پنومونيه

Tissue and Molecule Investigation and the Effect of Copper Nanoparticles Synerigm with Antibiotics on Colorectal Cancer Tumors Infected to Kelebsiella pneumonia

زمينه و هدف: سرطان كولوركتال دومين سرطان رايج در جهان مي ­باشد. دامنه تغييرات ژنتيكي در ايجاد سرطان كولوركتال وسيع بوده و بررسي­ ها نشان مي­دهد كه عفونت با باكتري كلبسيلا پنومونيه كه حاوي ژن­ هاي pks است، مي ­تواند باعث شروع سرطان كولوركتال شود. كلبسيلا عامل بيماري­هاي عفوني با درمان سخت است. اثرات جانبي مصرف آنتي بيوتيك كه براي درمان به كار مي ­رود بسيار بالاست. اين مطالعه با هدف مسيري براي از بين بردن مقاومت دارويي و استفاده از دوز پايين آنتي بيوتيك در نوعي عفونت خاص باكتريايي كه امكان ايجاد تغيير در سلول روده­اي و بروز سرطان مي ­شود و شايد به پيشگيري يا درمان كمكي كنند طراحي شده است. روش كار: در اين روش بعداز تهيه نانو ذرات مس با اندازه 20 نانومتر و درجه خلوص 99/09 %، جداسازي و شناسايي باكتري كلبسيلا با استفاده از روش ­هاي رايج ميكروبيولوژي مولكولي انجام شد. جهت شناسايي مقاومت باكتري ديسك گذاري به روش كربي و باير (Kirby & bauer) همراه با غلظت­ هاي متفاوت نانوذره مس صورت پذيرفت. اثر هم­افزايي با آنتي بيوتيك با آغشته كردن ديسك آنتي بيوتيك هاي مورد استفاده با بيشترين غلظت نانو ذره مس كه اثر مهاركنندگي نداشت صورت گرفت. در اين مطالعه سويه ­هاي حاوي ژن pks از طريق pcr شناسايي و جداسازي شدند، سپس با تست ­هاي مختلف اثرات ضد ميكروبي نانوذرات مس و آنتي بيوتيك هاي بر روي سويه­ هاي مذكور مورد بررسي قرار گرفت. آنتي بيوتيك هاي مقاوم به سويه­ هاي مذكور شناسايي شد. نسبت به نانو ذرات مس باكتري­ هاي مزبور حساس بوده بيشترين غلظت نانو ذرات مس كه اثر مهاركنندگي نداشت انتخاب شد. يافته ها: سنجش هاله عدم رشد نشان داد كه غلظت 52ppm بالاترين غلظتي است كه اثر بازدارندگي نشان مي­ دهد. كلبسيلا پنومونيه به آنتي بيوتيك ­هاي اريترومايسين، پيپراسيلين، كليندامايسين و آموكسي سيلين مقاوم و در بررسي اثر سينرژيسم، اثر هم ­افزايي اين دو ماده بر باكتري كلبسيلا پنومونيه خاصيت ضد ميكروبي نشان داد. نتيجه گيري: با استفاده از كمترين غلظت نانوذرات كه اثر سينرژيستي با آنتي بيوتيك هاي مقاوم نشان مي دهد، مي ­توان با استفاده از نانوبيوتيك اين بيماري را درمان و پيشگيري نمود.

Inroduction & Objective: Colorectal is second common type of cancer in the universe. Genetic alteration scope in Colorectal is wide spread and inspections indicates infection to special kind of Kelebsiella pneumoniae bacteria which includes pks genes, can cause Colorectal cancer. A Kelebsiella bacterium is the reason for infectious diseases with challenging cures. Anti-biotic which are taken to cure (remedy) are of high side effects. This study is designed for the purpose of eliminating drug resistance and making use of low dose antibiotics in specific bacterial infections which makes change possible in intestine cell and incidence of cancer and may help cure or prevention.Material and Methods:In this method the investigation was carried out after supplying copper nanoparticles from Nano Pars Company with scale of 20 nanometer, purity degree of 99.9%, isolation and identification of Kelebsiella bacterium performed using common microbiologic and molecular methods. Kirby and Bauer method used in order to investigate bacterium resistance with different density of copper nanoparticles. The Synergistic effect or anti-biotic was investigated by impregnated anti-biotic discs with highest density of copper nanoparticles which not possess inhibitoringeffect. In this study strains including pks gene, were identified and isolated through PCR, then through different tests antimicrobial effects of copper nanoparticles and antibiotics upon mentioned strains was investigated. Antibiotics resistant to strains were identified. Mentioned bacteria sensitive to copper nanoparticles highest concentrations of copper nanoparticles that was not inhibited, concluded that using the lowest concentration of nanoparticles that demonstrated synergistic effects with antibiotic resistant.Results: The overall result can be used for treatment and prevention using nano biotic. In comparison with copper nanoparticles aforesaid bacteria were sensitive, highest density of copper nanoparticles which had no controlling effect, were selected.Conclusion:General result was that through using lowest density of nanoparticles which the impact of Synergistic with resistant anti-biotic indicated, nano-biotic can be used for curing and prevention.