اثر فيستين در القا مرگ سلولي بر سلو ل هاي سرطان كولون رده ي CT-29

The Effect of Fistin on Inducing Cell Death on Colon Cancer CT-29 Cell Line

زمينه و هدف: فيستين فلاونوئيدي است كه مي تواند به طور مستقيم از طريق تغذيه بر سلامت انسان تاثير گذار باشد. تا كنون اثرات اين فرآورده طبيعي در جلوگيري از تكثير و القاي آپوپتوز در سلول هاي سرطاني مختلف گزارش شده اما اثرات آن بر سرطان كولون رده سلولي CT-29 بررسي نشده است. هدف از مطالعه حاضر بررسي اثرات آپوپتوتيكي فيستين بر سلول هاي سرطان كولون CT-29 مي باشد. روش كار: سلول هاي سرطاني رده ي CT-29 با غلظت هاي 25 ،50، 75، 100 و 125 ميكروگرم بر ميلي ليترفيستين به مدت 48 ساعت تيمار شدند. ميزان زيست پذيري سلول ها و غلطت مهاري IC50 با آزمون MTT محاسبه گرديدجهت بررسي القاي آپوپتوز در سلول هاي CT-29 از روش هاي رنگ آميزي DAPI و اكريدين اورنج- پروپوديوم يدايد، آناليز فلوسايتومتري انكسين 5 پروپوديوم يدايد و بررسي بيان ژن هاي Bax, Bcl2 استفاده شد. يافته ها: يافته هاي حاصل از آزمون MTT نشان داد فيستين به صورت وابسته به دوز باعث مهار تكثير سلول هاي َCT-29 مي شود. نتايج رنگ آميزي DAPI نشان داد كه فيستين منجر به تراكم و شكست هايي در كروماتين مي گردد، رنگ آميزي اكريدن اورنج-ﭘﺮوﭘﻴﺪﻳﻮم ﻳﺪاﻳﺪ نشان دهنده افزايش درصد سلول هاي آپوپتوزي در سلول هاي تحت تيمار بود. هم چنين نتايج حاصل از بررسي هاي Real Time PCR نشان داد كه درحالي كه بيان ژن Bax در سلول تحت تيمار افزايش مي يابد بيان ژن Bcl-2 در سلول هاي تيماري كاهش مي يابد. نتيجه ­گيري: بر طبق يافته هاي اين پژوهش فيستين باعث القاي آپوپتوز در سلول هاي سرطاني CT-29 مي گردد. استفاده از اين فلاونوئيد مي تواند به عنوان يك استراتژي اميدواركننده در درمان سرطان كولون مورد توجه قرار گيرد.

Introduction & Objective: Fistin is a dietary flavonoid that can directly effect on human health. The effects of this natural product have been reported on induction of apoptosis in some cancer cells, but its effects on colon cancer of the cell line of CT-29 dont have been investigated. The aim of this study was to investigate the effects of fistin apoptosis on CT-29 colon cancer cells. Material and Method: CT-29 cancer cells were treated with 25, 50, 75, 100 and 125 ug/ml of fisetin for 48 hours. The rate of cells vaiability were calculated by MTT assay. For detection apoptosis induction in CT 29 DAPI staning, Acridine Orange-Propodium iodine staning, Anxin 5-Propodium iodide flow cytometry and Bax, Bcl2 expression analysis were used. Results: The findings of the MTT assay showed that fistin dose-dependently inhibits the proliferation of CT-29 cells. DAPI staining results showed that fistin leads to chromatin defects, Orange-Propidium iodide staning showed increase in the percentage of apoptotic cells in treated groups. Also, the results of Real Time PCR showed Bax gene expression increased but, the expression of Bcl-2 gene decreased. Conclusion: Cording to the findings of this study, fistin induces apoptosis in CT-29 cancer cells. Using this flavonoid can be considered as a promising strategy in the treatment of colon cancer.