شناسايي باكتري‌هاي انتروكوكوس ازدستگاه گوارش زنبور عسل كوچك (Apis florea Fabricius, 1973 (Hymenoptera: Apidae

Identification of Enterococcus bacteria in gastrointestinal tract of dwarf honey bee, Apis florea Fabricius, 1973 (Hymenoptera: Apidae

باكتري‌ هايلاكتيك اسيد با گونه‌هاي مختلف جنس Apis روابط همزيستي دارند كه مي‌توانند اثرات زيادي بر روي ميزبانشان داشته باشند. در اين پژوهش 1400 زنبور عسل كارگر مربوط به 14 كلني از استان هاي سيستان و بلوچستان، كرمان، هرمزگان، فارس، كهكيلويه و بوير احمد، بوشهر، خوزستان و ايلام جمع آوري گرديد. نمونه‌ها در لوله‌هاي استريل حاوي نرمال سالين قرار داده شد، سپس جداسازي باكتري‌ها از دستگاه گوارش زنبور عسل كوچك با استفاده از محيط كشت‌هاي اختصاصي انجام گرفت. براي شناسايي، تست‌هاي بيوشيميايي و سپس استخراج DNA كلني‌هاي جدا شده انجام شد. تشخيص مولكولي كلني‌ها با روش تعيين توالي ژن 16S rDNA و با استفاده از پرايمرهاي اختصاصي انجام گرفت. پس از تعيين توالي و شناسايي نمونه‌ها، با به كار بردن نرم افزارهاي مختلف ژنتيكي باكتري‌هايي كه با هم از نظر ژنتيكي فاصله داشتند در بانك جهاني ژن (NCBI) ثبت گرديد. در اين آزمايش با تعيين توالي 30 كلني از باكتري‌هاي جداسازي شده از دستگاه گوارش زنبور عسل كوچك، در مجموع 5 سويه مختلف متعلق به 3 گونه Enterococcus faecalis، Enterococcus faeciumوEnterococcus hiraeشناسايي شدند. با توجه به نتايج بدست آمده زنبورهاي عسل كوچك در ايران از لحاظ باكتري‌هاي انتروكوكوس موجود در دستگاه گوارش به 4 گروه طبقه‌بندي شدند. به طور كلي جداسازي و شناسايي اين باكتري‌ها مي تواند قدم مثبتي در جهت افزايش درجه سلامت مواد غذايي مورد استفاده انسان‌ها و حيوانات باشد.

Apis species that engage in symbiotic association with Lactic Acid Bacteria (LAB), have diverse functions on their hosts. This study was intended to isolate and identify aeoccus bacteria living in the gastrointestinal tract of Asian dwarf honey bee, Apis florea,in Iran. One hundred isolates were Gram-stained and tested for catalase reaction. By using bacterial universal primers, the 16S rDNA gene of bacterial colonies was amplified. 16S rDNA genes from thirty bacteria were sequenced. Phylogenetic analysis showed that Enterococcus flora in the gastrointestinal tract of A. florea, contained five phenotypes which classified in the species E. faecium, E. faecalis and E. hirae. Based on the specific association between bacteria and A. florea, we divided the Asian dwarf honey bee populations into four categories.