عنوان مقاله :
بررسي اثر تكثير سلول هاي خون ساز +CD133 جدا‌شده از خون بند ناف در in vitro بر بيان MicroRNAهاي شكل دهنده فرايند خون سازي
عنوان به زبان ديگر :
Effects of in vitro expansion of CD133+ hematopoietic stem cells isolated from umbilical cord blood in expression of microRNAs involved haematopoiesis
پديد آورندگان :
شهرابي، سعيد دانشگاه تربيت مدرس - دانشكده پزشكي - گروه خون شناسي , كاوياني، سعيد دانشگاه تربيت مدرس - دانشكده پزشكي - گروه خون شناسي , سليماني، مسعود دانشگاه تربيت مدرس - دانشكده پزشكي - گروه خون شناسي , پورفتح اله، علي اكبر دانشگاه تربيت مدرس - دانشكده پزشكي - گروه ايمني شناسي , ذنوبي، زهرا دانشگاه علوم پزشكي شهيد بهشتي - بيمارستان مهديه
كليدواژه :
خون سازي , ميكرو آر ان آ ها , سلول بنيادي خون ساز+CD133 , خون جنين
چكيده فارسي :
سابقه و هدف: يكي از راه هاي كنترل فرايند خون سازي، تنظيم به وسيله MicroRNA هاي مختلف مي باشد. اين RNA هاي كوچك تنظيم كننده با تغيير در بيان ژن ها در مرحله پس از رونويسي، توانايي كنترل مراحل مختلف خون سازي را دارا مي باشند. درمان بيماري هاي مختلف با استفاده از سلول هاي +CD-133 كه از خون بند ناف جدا شده و در محيط آزمايش گاه تكثير يافته اند در حال گسترش مي باشد. هدف اين مطالعه بررسي تغييرات ايجاد شده در بيان MicroRNA هاي شركت كننده در فرايند خون سازي در مراحل مختلف تكثير اين سلول ها در in vitro بود.
مواد و روش ها: سلول هاي بنيادي خون ساز +CD133 خون بند ناف به روش MACS جدا گرديد. اين سلول ها پس از شمارش و تاييد توسط فلوسيتومتري، جهت بررسي اثر تكثير بر بيان MicroRNA ها در دو گروه مورد مطالعه قرار گرفتند. در گروه اول RNA اين سلول ها بلافاصله پس از جداسازي استخراج گرديد و در گروه دوم سلول ها 12 روز پس از تكثير در آزمايش گاه مورد مطالعه قرار گرفتند. جهت بررسي بيان MicroRNA ها از تكنيك qPCR Real time استفاده شد.
يافته ها: يافته ها نشان دادند كه از مجموع 23 عدد MicroRNA بررسي شده در دو مرحله قبل و بعد از تكثير، بيان 11 عدد از MicroRNA ها بدون تغيير بود. در حالي كه در مرحله قبل نسبت به مرحله بعد از تكثير، بيان 7 عدد از MicroRNA ها با افزايش و بيان 5 عدد از MicroRNA ها هم با كاهش هم راه بود.
نتيجه گيري: نتايج ما نشان دادند كه تكثير سلول هاي بنيادي خون ساز در محيط آزمايش گاه سبب تغيير در بيان MicroRNA هاي شركت كننده در فرايند خون سازي مي گردد. به طوري كه اين تغييرات سبب افزايش بيان MicroRNA هاي مسوول تمايز و كاهش بيان MicroRNA هاي شركت كننده در همانند سازي اين سلول ها مي گردد
چكيده لاتين :
Introduction: Hematopoiesis is regulated by different microRNAs (miRNA). These small regulatory RNAs control hematopoiesis at different stages with changing in the expression of genes at posttranscriptional levels. Treatment of various diseases is increasing with using CD133+ hematopoietic cells isolated and in vitro expanded from the umbilical cord blood. This study was performed to show alteration of microRNAs levels involved in hematopoiesis in CD133+ hematopoietic cells isolated and invitro expanded from the umbilical cord blood.
Materials and Methods: Umbilical cord blood CD133+ hematopoietic stem cells were isolated by MACS and then the cells confirmed and counted by using flowcytometery and finally were divided into two groups .In the first group RNA was extracted from the cells and the cells in the second group were cultured invitro for 12 days and then these cells were used to assess micoRNAs expression using qPCR real time.
Results: The results showed that from 23 microRNAs, expression of 11 microRNAs was the same in two groups whereas expression of 7 and 5 microRNAs were respectively increased and decreased following in vitro culture.
Conclusion: Based on our results, in vitro expansion of the hematopoietic stem cells results in increased microRNAs levels which are responsible for differentiation and decreased microRNAs levels which are responsible for self- renewal.
