ريزازديادي توس از طريق كالوس برگ آن

Micropropagation of birch (Betula litwinowii) from leaf callus

گونه­هاي توس به­دليل دارا بودن ارزش دارويي، صنعتي و زينتي از اهميت ويژه­اي برخوردار مي­باشند. litwinowii Betula يكي از دو گونه توس در حال انقراض ايران مي‌باشد كه در سنگده ساري رويش دارد. در پژوهش حاضر، ريزنمونه­هاي برگ پس از اعمال تيمارهاي سترون­سازي (كلريد جيوه 1/0 درصد، الكل 70 درصد و هيپوكلريت سديم 25 درصد در زمان­هاي مختلف) در دو محيط كشت WPM و MS با غلظت­هاي مختلف هورمون­هاي BAP و 2,4-D جهت توليد كالوس و باززايي گونه litwinowiiB.دز آزمايشگاه كشت بافت دانشگاه علوم كشاورزي و منابع طبيعي گرگان كشت گرديدند. نتايج نشان داد تيمار كلريد جيوه 1/0 درصد به­مدت 7 دقيقه بهترين روش سترون­سازي ريزنمونه­ها بود. محيط كشت پايه WPM حاوي يك ميلي­گرم در ليتر BAPو 1/0 ميلي­گرم در ليتر 2,4-Dبهترين محيط كالوس­زايي شناخته شد. همچنين 10 ميلي­گرم در ليتر Zeatin در تركيب با 20 ميلي­گرم در ليتر آدنين سولفات براي القاي اندام­زايي كالوس­ها مناسب بود. تركيب BAP 5/0 ميلي­گرم در ليتر و آدنين سولفات 20 ميلي­گرم در ليتر با 20 درصد اندام­زايي به‌عنوان بهترين تيمار انتخاب شد. درنهايت گياه­چه­ها در محيط WPM حاوي IBA و NAA (يك ميلي­گرم در ليتر) ريشه­دار شدند. روش ريزازديادي توس كه در پژوهش حاضر بهينه گرديد، در بيوتكنولوژي با هدف پيشبرد ژنتيكي درختان توس و نيز ريزازديادي در مقياس وسيع و تكثير تجاري نيز قابل توصيه است.

Birch (Betula sp) species is too important because of little regeneration in mountain cliff region, medicinal, industrial and ornamental function. Betula litwinowii is one of two tree species Birch in Iran that is endangered and grown in Sangdeh of Sari County. In this study, leaf explants after sterilized by applying different treatments (HgCl2 0.1%, Ethanol 70% and NaClO 25% in different times) in both MS and WPM medium with various concentrations of BAP and 2,4-D hormones, for calli produce and reproduction of B. litwinowiispeciesin Gorgan University of Agricultural Sciences and Natural Resources In vitro lab were cultured. Result showed that HgCl2 (0.1% for 7 min) was the best method for sterilization of explants. The WPM medium enriched BAP (1 mgl-1) and 2, 4-D (0.1 mgl-1) was found to be the best medium for callgenesis. The concentrations Zeatin (10 mgl-1) and AS (20 mgl-1) hormones Too were suitable for Stimulation organogenesis. Combination of BAP (0.5 mgl-1) and AS (20 mgl-1) hormones was selected the best treatment with 20% organogenesis. Finally, plantlets in WPM medium with (IBA and NAA 1 mgl-1) rooted. Micropropagation of Birch that improved in this research, in biotechnology research with aim of Birch genetics progression are usable.