تمايز سلول‌ هاي آندودرم قطعي از سلول‌ هاي پرتوان القا‌شده انساني با استفاده سيگنالينگ مولكولي

Derivation of definitive endoderm from human induced pluripotent stem cells using signaling molecules

سابقه و هدف: در سال هاي اخير توانايي جاي گزين ساختن سلول هاي تخريب شده بتاي توليد كننده انسولين به وسيله سلول هاي جديد توليد كننده انسولين براي درمان مناطق آسيب ديده در بيماري ديابت يك پتانسيل درماني قابل قبول محسوب مي شود. نظريه توليد سلول هاي القا شده انساني از سلول هاي بيماران ديابتي و تمايز آن ها به سلول هاي توليد كننده انسولين، دريچه جديدي از اميد براي به كار بردن اين سلول ها در درمان بيماري ديابت بدون نگراني از رد پيوند توسط سيستم ايمني و مشكلات اخلاقي باز كرده است. مواد و روش ها: در اين مطالعه سلول هاي پر توان القا شده انساني (hiPS) از سلول هاي استرومايي چشم مشتق شده و سپس به مدت 5 روز در ظروف نچسب كشت تا اجسام جنيني (EBs) تشكيل و سپس با استفاده ازActivin A و Wnt3a به سلول هاي آندودرم قطعي تمايز داده شدند. يافته ها: بيان ماركرهاي آندودرمي FoxA2 و Sox17 در سطح mRNA با استفاده از qRT-PCR بررسي و بيان اين ماركرها در سطح پروتيين با رنگ آميزي ايمونوسيتوشيمي تاييد گشت. نتيجه گيري: نتايج اين مطالعه نشان داد كه سلول هاي آندودرم قطعي مي توانند تحت تيمار Activein A و Wnt3a از سلول هاي hiPS توليد شده و هم چنين مي توانند به عنوان پيش سازهايي براي درمان بيماري هاي كبدي و ديابت به كار روند.

Introduction: In recent years, the idea of being able to replace the destruction of insulin-producing beta cells of the pancreas by introducing new cells to repairthe damaged areas has become an accepted potential treatment for Diabetes mellitus. The idea to generate pluripotent stem (iPS) cells specific from diabetic patient and differentiate to insulin-producing cells has opened a new window to using of iPS cells as new source for cell therapy of diabetes without being worried about the immunologica rejection or ethical issues. Materials and Methods: In the present study, iPS cells were directly generated from the human conjunctive-stromal cells and they were subjected to embryoid body formation for 5 days and differntiatied to definitive endoderm cells usingActivin A and Wnt3a. Results: Differentiated cells were subjected to qRT-PCR using primers for FoxA2 and Sox17 genes as marker of definitive endoderm. Conclusion: To confirm the result in the level of protein the immucocytochemistry will be undertaken. In conclusionthe result of this study can clarify the effect of Activein A and Wnt3a in definitve endoderm derivation of iPS and will utilize these cells as precursors for cell therapy for hepatic and diabetics disease.