بررسي ميزان بيان ژن ها ي B ax و Bcl-2 و فعاليت آنزيم كاسپاز 3 در بافت كبد رت ها ي نرمال، ديابتي نوع 1 و 2 قبل و بعد از درمان با عصاره آبي سير

The level of gene expression of Bax and Bcl-2 and the activity of caspase 3 in the liver tissues of normal, type 1 and type 2 diabetic rats before and after treatment with aqueous extract of garlic

مقدمه: يكي از عوارض ديابت مليتوس القاي آپوپتوز در بافت كبد است. آپوپتوز از طريق فعال شدن آنزيم كاسپاز 3 در سلول ها ايجاد مي شود. سير به عنوان يك تركيب گياهي پرمصرف در رژيم غذايي است كه تاكنون اثر آن در آپوپتوز بررسي نشده است. در اين مطالعه اثرات عصاره آبي اين گياه در ميزان بيان ژن ها Bax و Bcl-2 و فعاليت كاسپاز 3 در رت ها ديابتي نوع 1 و 2 مورد مطالعه قرار گرفته است. روش بررسي: در اين مطالعه آزمايشگاهي، رت ها نژاد ويستار به شش گروه كنترل سالم، ديابتي نوع 1، ديابتي نوع 1 درمان شده با عصاره سير، ديابتي نوع 2، ديابتي نوع 2 درمان شده با عصاره سير و كنترل سير تقسيم شدند. در پايان زمان تيمار، بافت كبد رت ها سريعا خارج شد و بلافاصله در -70oC ذخيره شد. جهت بررسي بيان ژن استخراج RNA، سنتز cDNA و Real time PCR انجام شد. اندازه گيري فعاليت آنزيم كاسپاز 3 به روش فلوريمتري انجام شد. نتايج: ميزان بيان ژن ها مورد نظر در گروه ها مختلف تغييرات معني داري را نشان نداد. ميزان فعاليت آنزيم كاسپاز 3، افزايش معني داري را در گروه ديابتي نوع 1 در مقايسه با گروه كنترل نشان داد (p=0.003). فعاليت اين آنزيم در رت ها ديابتي نوع 1 درمان شده با سير، نسبت به رت ها كنترل همچنان بالا بود (p=0.021). در رت ها ديابتي نوع 2 درمان شده با سير و درمان نشده و رت ها كنترل سير تغييرات فعاليت آنزيم، نسبت به گروه كنترل معني دار نبود. نتيجه گيري: ديابت نوع 1 سبب القاي آپوپتوز شده است ولي عصاره سير سبب بهبود اين آسيب نشده است.

Introduction: One of the complications of diabetes mellitus is induction of apoptosis in liver tissues. Activation of caspase 3 caused apoptosis in the cells. Garlic is a most common plant in diet that its effect on apoptosis was not determined. In this study the effects of this extract on Bax and Bcl-2 gene expression and the activity of caspase 3، were determined in type 1 and 2 of diabetes in rats. Methods: Wistar rats divided into six groups included normal control rats، diabetes type 1 (D1)، diabetes type 1 treated with garlic extract (D1G)، diabetes type 2 (D2)، diabetes type 2 treated with garlic extract (D2G) and garlic control (G). At the end of treatment time، liver tissues were removed quickly and stored in -70 °C. For evaluation of gene expression، RNA extraction، cDNA synthesis and Real time PCR were done. The activity of caspase 3 was determined with flourometric method. Results: The level of gene expression of Bax and Bcl-2، did not change significantly in different groups. The activity of caspase 3 in D1 rats، increased significantly compared to the control rats(p=0.003). The activity of this enzyme was high in D1G compared to control rats yet (p=0.021). In D2، D2G and G groups، caspase activity was not changed in comparison with the control rats Conclusion: Diabetes mellitus type1 caused apoptosis in rat livers، but garlic extract cannot ameliorate it.