بررسي تأثير كوركومين (زردچوبه) بر بيان ژن هاي Nano ،OCT4 و Nucleostemin در رده سلول سرطاني AGS (آدنوكارسينوماي معده)

The survay of curcumin effect on the expressional profile of OCT4, Nanog and Nucleostemin genes in AGS (adenocarcinoma) cancer cell line

مقدمه: كوركومين رنگدانه زرد طبيعي جدا شده از ريزوم زردچوبه مي باشد و از بين برنده مقاومت سلول هاي سرطاني به داروهاي شيمي درماني است. هدف از مطالعه حاضر بررسي تاثير غلظت هاي مختلف عصاره الكلي زردچوبه بر بيان ژن هاي اصلي كنترل كننده مسير ناميرايي شامل OCT4 ،Nanog و Nucleostemin در رده سلولي AGS (آدنوكارسينوماي معده) مي باشد. مواد و روش ها: رده سلول سرطاني آدنوكارسينوم معده (AGS) در محيط كشت RPMI 1640 كشت داده شد. پس از اطمينان از صحت سلول ها، سلول ها در دو گروه آزمون و كنترل با شرايط يكسان در پليت هاي شش خانه اي مخصوص كشت سلول، كشت شدند. پس از رسيدن تراكم سلولي به 70-60 درصد، گروه آزمايش در معرض غلظت هاي 20، 40 و 100 ميكروگرم در ميلي ليتر كوركومين قرار گرفته و پس از گذشت بازه هاي زماني 24، 48 و 72 ساعت، سلول ها جدا شده، پس از تخليص Total RNA و سنتز cDNA، ميزان بيان ژن هاي مورد نظر (OCT4A ،OCT4B ،OCT4B1 ،Nanog و Nucleostemin) در هر دو گروه تعيين و ميزان تغييرات بياني اين ژن ها با استفاده از فرمول 2-^^ct تعيين گرديد. يافته ها: نتايج نشان داد كوركومين باعث كاهش بيان دو واريانت OCT4 (OCT4A و OCT4B) و ژن هاي NANOG و Nucleostemin (GLN3) مي شود در حاليكه واريانت OCT4B1، افزايش بيان نشان مي دهد. نتيجه گيري: نتايج اين مطالعه نشان مي دهد كوركومين مي تواند به عنوان يك عامل مهار كننده تقسيمات سلولي، در پيشگيري از سرطان كه بواسطه تقسيمات كنترل نشده سلولي ايجاد مي شود، مورد توجه قرار گيرد. همچنين اين مطالعه مي تواند بستري براي مطالعات گسترده تر در خصوص تاثير ضد سرطاني اين تركيب گياهي باشد.

Introduction: Curcumin is the natural yellow pigment in turmeric isolated from the rhizome of the plant Curcuma longa. Curcumin inhibits formation and invasive cancer cells and destroys cancer cells resistant to chemotherapeutic drugs. The purpose of this study was the survey of effects of different concentrations of alcoholic curcumin on the OCT4, Nanog and Nucleostemin genes in the AGS (gastric adenocarcinoma) cell line. Material and Methods: The AGS cell line was cultured in RPMI-1640 (Gibco), supplemented with penicillin/streptomycin (100 U/ml and 100 lg/ml, respectively) and 10% fetal bovine serum, at 37°C in a humidified atmosphere of 5% CO2. in 60–70% cell confluence, the cells were treated with Curcumin Cocentration (20,40, 100) μl and incubated for 24,48 and 72 hours. Finally, total RNA werecextracted and cDNA were synthesized and the expression of mentioned genes was detected. Results: expression rate of OCT4A, OCT4B, NANOG and Nucleostemin (GLN3) at concentrations less than 20 μg/ml were reduced but OCT4B1 expression showed increased by hours respectively. Conclusion: The results showed that curcumin inhibited cell division, also, this study could be the basis for more extensive studies on the anti-cancer effect of the combined plants.