تشخيص مولكولي و تعيين گونه انگل ليشمانيا در بيماران مبتلا به ليشمانيوز جلدي

Diagnosis and Molecular Typing of Leishmania in Patients with Cutaneous Leishmaniasis

ايران يكي از كانون هاي ليشمانيوز جلدي در جهان است. اين بيماري در برخي مناطق گرمسيري استان كرمانشاه به طور معمول ديده مي شود. در اين مطالعه بيماران مبتلا به ليشمانيوز جلدي شناسايي شده و با روش rflppcr و تعيين سكانس dna تعيين گونه شدند.مواد و روش ها: در اين مطالعه توصيفي تمامي بيماران مشكوك به ليشمانيوز جلدي مراجعه كننده به كلينيك دانشگاه علوم پزشكي كرمانشاه طي سال 94، با روش ميكروسكوپي و مولكولي شناسايي شدند. گونه هاي ليشمانيا با روشrflppcr و تعيين سكانس ژنومي شناسايي شدند.يافته ها: 47 نفر (72/3 درصد) از 65 بيمار بررسي شده، مبتلا به سالك بودند. به ترتيب 64/4 درصد و 35/3 درصد آن ها مذكر و مونث بودند. 2/49 درصد از بيماران ساكن كرمانشاه و 50/8 درصد ساكن شهرستان هاي ديگر استان بودند. 47/7 درصد بيماران سابقه مسافرت به استان هاي ديگر در چند ماه گذشته را داشتند. اجسام ليشمن به ترتيب در 50/8 درصد و 72/3 درصد از بيماران با روش ميكروسكوپي و pcr شناسايي شدند. با روش pcr rflp، به ترتيب 14/9 درصد و 84/1 درصد از نمونه هاي مورد بررسي به عنوان ليشمانيا تروپيكا و ليشمانيا ماژور شناسايي شدند. تعيين توالي ژنومي انجام شده در 5 نمونه از محصولات pcr، نتايج روش pcr rflp را در تعيين گونه هاي ليشمانيا تاييد نمود.استنتاج: ليشمانيا ماژور گونه غالب ليشمانيوز جلدي در استان كرمانشاه است. روش مولكولي pcr حساسيت بيش تري نسبت به روش ميكروسكوپي در شناسايي بيماري سالك دارد و rflppcr روش مناسبي براي شناسايي گونه هاي ليشمانيا مي باشد.

Background and purpose: Iran is one of the endemic focuses of cutaneous leishmaniasis (CL) in the world. The disease is commonly seen in some tropical regions of Kermanshah province (West of Iran). In this study, patients with CL were diagnosed and identified using RFLP-PCR and DNA sequencing. Materials and methods: In this descriptive study all suspected cases of CL attended a clinic affiliated with Kermanshah University of Medical Sciences in 2015 were diagnosed by microscopic and molecular methods. The Leishmania species were identified by PCR-RFLP and genomic sequencing. Results: There were 65 patients of whom 47 (72.3%) were detected as CL including 64.6% males and 35.4% females. Among the patients 49.2% were resided in Kermanshah, and 50.8% lived in other cities of the province. It was found that 47.7% of the patients had history of travel to other provinces in previous months. Leishman bodies were detected in 50.8% and 72.3% of the patients by microscopic observation and PCR technique, respectively. By RFLP-PCR, 14.9% and 84.1% of positive samples were identified as Leishmania tropica and Leishmania major, respectively. The PCR product sequences of 5 samples confirmed the results of PCR-RFLP in identification of the Leishmania species. Conclusion: Leishmania major is the main cause of CL in Kermanshah province. PCR is believed to be more sensitive than microscopic method for detection of CL and RFLP-PCR is an appropriate technique for identification of Leishmania species