بهينه سازي روش كشت آكانتاموبا با استفاده از محيط كشت tym

Improved Acanthamoeba Culture Method Using TYM Medium

سابقه و هدف: گونه هاي آكانتاموبا، ارگانيسم هاي آمفي زوئيكي هستند كه در همه جا يافت مي شوند و مي توانند بيماري هاي كشنده اي مانند كراتيت و آنسفاليت را در انسان و حيوانات اهلي ايجاد كنند. اولين گام در مطالعات مرتبط با آكانتاموبا، دستيابي به مقدار زياد آميب در محيط كشت است. هدف اصلي مطالعه حاضر ارزيابي محيط tym به عنوان يك محيط غني براي تشخيص كراتيت هاي آكانتاموبايي در خراش قرنيه بوده است.مواد و روش ها: يك گونه آكانتاموبا كه قبلاً ژنوتيپ شده بود، در اين مطالعه تجربي مورد استفاده قرار گرفت. آكانتاموبا در پنج پليت كشت آگار غيرمغذي 1.5 درصد nna nonnutrient agar همراه باكتري اشرشياكلي (e.coli) و بدون اضافه كردن tym و پنج پليت آگار غيرمغذي 1.5 درصد به همراه باكتريe.coli با محيط tym كشت داده شد. رشد آميب با ميكروسكوپ معكوس بعد از 24 و 48 ساعت بررسي گرديد.يافته ها: نتايج نشان داد كه افزودن محيط tym، رشد تروفوزوئيت ها را 8/8 برابر افزايش مي دهد و آميب ها را مي توان بعد از 24 تا 48 ساعت از محيط جدا كرد.استنتاج: با توجه به رشد قابل توجه آكانتاموبا در محيط كشت nna بهينه شده، استفاده از اين محيط براي انبوه سازي و شناسايي به موقع آكانتاموبا در نمونه هاي باليني و محيطي توصيه مي شود.

Background and purpose: Acanthamoeba species are ubiquitous amphizoic organisms which can cause lethal diseases, such as keratitis and encephalitis in domestic animals and humans. The first stage in studies related to Acanthamoeba is achieving abundant amount of amoebae in culture medium. The aim of this study was to evaluate TYM medium as a rich medium for the diagnosis of Acanthamoeba keratitis in corneal scrapes. Materials and Methods: In this experimental study, we used one species of Acanthamoeba that was previously genotyped. Acanthamoeba was cultured in five plates of non-nutrient agar (NNA) medium with E.coli without TYM and in five plates of non-nutrient agar containing E.coli and TYM. Amoebae growth was observed for 24 to 48 hours by invert microscope. Results: According to current results using TYM medium increased the growth of trophozoites 8.8 folds and amoebas can be isolated form medium after 24 to 48 hours. Conclusion: Due to the significant growth of Acanthamoeba in NNA improved medium, it is recommended for agglutination and early detection of Acanthamoeba in clinical and environmental samples.