جداسازي و تشخيص استافيلوكوكوس اورئوس مقاوم به متي سيلين بر پايۀ بيان ژن هاي بيماري زايي sei، lukED، hla و hlg از عفونت پاي بيماران ديابتي در استان مازندران

Isolation and Identification of Methicillin Resistant Staphylococcus aureus Based on hla , lukED, sei, and hlg Virulence Genes in Patients with Diabetic Foot Infection in Mazandaran Province

زمينه و هدف: استافيلوكوكوس اورئوس مقاوم به متي سيلين شايع ترين عامل باكتريائي عفونت زخم پاي بيماران ديابتي (DFI) است. فاكتورهاي بيماري زايي اين باكتري شدت درجه عفونت زخم را افزايش مي دهد و در صورت درمان نشدن به موقع منجر به قطع عضو اندام هاي تحتاني و مرگ بيماران مبتلا مي شود. هدف اين پژوهش، جداسازي باكتري استافيلوكوكوس اورئوس مقاوم به متي سيلين حامل ژن mecA و شناسايي 4 ژن ويرولانس hla ، lukED، sei و hlg از جدايه هاي عفونت پاي بيماران ديابتي به منظور ارزيابي نقش آن ها در ميزان شدت عفونت است. مواد و روش كار: از ترشحات چرك 30 بيمار مبتلا به عفونت پاي ديابتي در استان مازندران نمونه گيري شد و استافيلوكوكوس اورئوس بر اساس ويژگي هاي كشت و تست هاي بيوشيميائي خالص سازي شد. ارزيابي مولكولي جدايه ها پس از استخراج DNA، با 5 جفت پرايمر اختصاصي ژن هاي مقصود به روش PCR صورت گرفت. يافته ها: از مجموع 30 بيمار 14 ايزوله (46/6%) استافيلوكوكوس اورئوس جداسازي و شناسايي شد. هر 14 نمونه حامل ژن mecA بودند و فراواني ژن هاي hla ، lukED ، sei و hlg در جدايه ها به ترتيب 100%، 100%، 71/4% و 64/2% به دست آمد. نتيجه گيري: شناسايي اين 4 ژن به همراه ژن mecA در استافيلوكوكوس اورئوس جداسازي شده از زخم پاي ديابتي مي تواند ماركر ژنتيكي موثر و قابل اعتمادي در تشخيص درجه بندي عفونت پاي بيماران ديابتي باشد. تشخيص عامل عفونت با روش PCR و درمان آنتي بيوتيكي مناسب و به موقع، در جلوگيري از قطع عضو بيماران ديابتي ضروري است.

Background and Aims: Methicillin-resistant Staphylococcus aureus is the most common bacterial agent of diabetic foot Infection (DFI).The Virulence factors of this bacterium increases the severity of the degree of wound infection, and if not treated promptly, results in lower limb amputation and death of the affected patients. The aim of this study was to isolate methicillin resistant Staphylococcus aureus carries the mecA gene and to detect 4 Virulence genes hla, lukED, sei and hlg from patients with diabetic foot infection in order to evaluate their role in severity of infection. Materials and Methods: 30 cases of diabetic foot infections in Mazandaran province were collected from pus drainage and Staphylococcus aureus was purified according to culture characteristics and biochemical tests. The molecular evaluation of the isolates after DNA extraction was performed with five pairs of specific primers of intended genes, by PCR method. Results: Of the 30 patients, 14 isolates (46.6%) of S. aureus were isolated and identified. Each 14 samples contained mecA gene and the frequency of hla, lukED, sei and hlg genes in isolates was 100%, 100%, 71.4% and 64.2%, respectively. Conclusions: Identification of these 4 genes with the mecA gene in S. aureus isolated from diabetic foot Infection can be an effective and reliable genetic marker for diagnosis of foot infection in diabetic patients. To prevent amputation, diagnosis of infection by PCR method and appropriate timely antibiotic therapy are required for Diabetic patients.