بررسي اثر پروتئين core ويروس هپاتيت HCV) C) بر روي بيان miR-150

The effect of HCV Core protein on the expression of miR-150

مقدمه: ويروس هپاتيت c hcv به عنوان يكي از عوامل اصلي بيماري زا براي بيماري هاي مزمن كبدي محسوب مي شود. مطالعات قبلي نشان داده اند كه پروتئين هاي ويروس hcv مي توانند با شبكه هاي تنظيمي ژن از قبيل micrornas ميانكنش برقرار كنند. هدف از اين مقاله بررسي اثر پروتئين core ويروس hcv بر روي بيان mir150 در يك مدل كشت سلولي بود.مواد و روش ها: پلاسميدهاي بيان كننده طول كامل پروتئين core ويروس hcv به داخل رده سلولي huh7 ترانسفكت گرديدند، در حاليكه در كنار آن از يك پلاسميد بيان كننده gfp خالي به عنوان يك گروه كنترل منفي استفاده شد. سپس rna تام استخراج شده و realtime pcr جهت اندازه گيري سطح بيان mir150 انجام شد. علاوه براين، تست trypan blue exclusion جهت بررسي اثر پروتئين core بر روي زنده ماني سلولي نيز انجام گرفت.يافته ها: آناليز بيان ژن mir150 در سلول هاي huh7 نشان داد كه پروتئين core درون زاد ويروس hcv مي تواند به طور معناداري باعث كاهش بيان mir150 در قياس با پلاسميد كنترل بيان كننده gfp و سلول طبيعي شود (0/01>p). در كنار اين، پروتئين core هيچگونه اثرات كشندگي سلولي يا تحريك كننده اي را بر روي سلول هاي كبدي پس از انجام تست trypan blue exclusion نشان نداد (0/05>p ).بحث و نتيجه گيري: مطالعه ما نشان مي دهد كه پروتئين core ويروس hcv مي تواند منجر به كاهش بيان mir150 شود. اين نتايج بيانگر آنست كه ميانكنش پروتئين هاي hcv با ماشين تنظيمي سلولي ممكن است در پاتوژنز مزمن بيماري هاي كبدي نقش داشته باشد.

Background : Hepatitis C virus (HCV) is considered as one of the major pathogenic agents of chronic liver diseases. Previous studies have shown that HCV proteins can interaction with gene regulatory networks such as microRNAs. The aim of this study was to investigate the effect of HCV core protein on the expression of miR-150 in a cell culture model. Materials and Methods: Plasmids expressing full HCV core protein was transfected into Huh7 cell lines while a GFP expressing plasmid employed as negative control. Subsequently، total RNA extracted and Real-Time PCR performed to measure the expression level of miR-150 expression. Moreover، trypan blue exclusion assay was performed to investigate the effect of core protein on cell viability. Results: The gene expression analysis of miR-150 in Huh7 cells showed that endogenous HCV core protein could significantly down regulation of miR-150 when compared to GFP control plasmid and normal cells (P<0.01). Beside، core protein induced no significant proliferative or cytotoxic effects on hepatic cells as determined by trypan blue exclusion assay (P<0.05). Conclusion: Our study suggests that HCV core protein can led to down regulation of miR-150 expression. This data revealed that HCV protein interactions with cell regulatory machinery may contribute to pathogenesis of chronic liver diseases.