بررسي و شناسايي ژن هاي كروم سنسينگ در سويه هاي سودوموناس آئروژينوزا جدا شده از نمونه هاي باليني انساني به روش Multiplex PCR و تعيين مقاومت آنتي بيوتيكي

The study and identification of Quorum Sensing (QS) genes of Pseudomonas aeruginosa strains isolated from human clinical samples by Multiplex PCR and antibiotic resistance determination

سودوموناس آئروژينوزا يك پاتوژن فرصت طلب و عامل 10 الي 15 درصد از عفونت هاي بيمارستاني مي باشد. وجود ژن هاي حدت يكي از مهم ترين مكانيسم هاي تهاجمي سودوموناس آئروژينوزا مي باشد و اين موضوع از نظر پزشكي از اهميت ويژه اي برخوردار است. بيان بسياري از ژن هاي بيماريزاي باكتري سودوموناس آئروژينوزا به وسيله يك سيستم ژني به نام سيستم quorum sensing (qs) كنترل و تنظيم مي گردند. كروم سنسينگ سيستم ارتباطي سلول به سلول با استفاده از مولكول هاي كوچك sms در ارگانيسم هاي تك سلولي است. هدف از تحقيق بررسي شيوع ژن هاي دخيل در سيستم كروم سنسينگ در سويه هاي سودوموناس آئروژينوزا جداشده از منابع انساني مي باشد.مواد و روش ها: در اين مطالعه، 60 نمونه سودوموناس آئروژينوزا از نمونه هاي گوارش انساني تهيه و در محيط هاي اختصاصي كشت و توسط تست هاي تشخيصي و افتراقي تاييد گرديدند. آزمون multiplex pcr براي رديابي ژن هاي مورد نظر انجام گرفت. آزمون حساسيت آنتي بيوتيكي عليه 10 عامل ضد ميكروبي صورت گرفت.يافته ها: نتايج multiplex pcr نشان داد كه ميزان فراواني ژن هاي rhlr 5 درصد، ژنlasr 48/3 درصد و ژنlasi 60 درصد بوده، در صورتي كه ژن هاي lasb،apr ، rhlab و rhli در هيچ يك از نمونه ها شناسايي نگرديدند. در آزمون حساسيت آنتي بيوتيكي، بيشترين ميزان مقاومت نسبت به آنتي بيوتيك هاي آميكاسين، آموكسي سيلين و سفوتاكسيم و بيشترين ميزان حساسيت به آنتي بيوتيك هاي سيپروفلوكساسين و سفتازيديم گزارش گرديده است.بحث و نتيجه گيري: ژن هاي سيستم qs فراواني بالايي در بين سويه هاي سودوموناس آئروژينوزا جداشده از منابع انساني دارند.

Background : Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic pathogen and the cause of 10% to 15% of nosocomial infections.Virulence genes of Pseudomonas aeruginosa is one of the most aggressive mechanisms and the issue of medical opinion is important. The expression of many genes is controlled and regulated in pathogenic bacteria Pseudomonas aeruginosa gene by a system called Quorum Sensing (QS). QS controls and regulates cell-to-cell communication system using small molecules in single-celled organisms SMs. This study was aimed at defining the prevalence of QS genes in Pseudomonas aeruginosa isolated from human resources. Materials and Methods: Initially 60 samples of Pseudomonas aeruginosa from human intestinal samples were prepared and confirmed by culture-specific diagnostic tests. Multiplex PCR test was performed to detect genes. Antimicrobial susceptibility of the isolates against 10 antimicrobial agents was determined using standard disk diffusion method. Results: Multiplex PCR results showed that the frequency of the desired genes rhlR 5 %، lasR 48.3% and lasI 60%. The genes lasB، apr، rhlAB and rhlI were not detected in any of the samples. According to antibiogram، the most resistance was against amikacin، amoxicillin and cefotaxime and the most susceptibility was to ciprofloxacin and ceftazidime. Conclusion: This study shows high prevalence of Quorom Sensing genes in Pseudomonas aeruginosa isolates of human origin.