بررسي تغييرات بيان miR 101 و ارتباط آن با ميزان بيان ژن‌هاي سركوب‌كننده تومور PTENو MAGI2 در سه رده سلولي سرطان پروستات

Evaluation of Mir-101 Expression Changes and its Correlation with PTEN and MAGI2 Gene Expression in Three Prostate Cancer Cell Lines

PTEN از ژن‌هاي مهم در روند سرطان پروستات است كه نقايص آن به عنوان آغازگر روند بدخيميشناخته مي‌شود. پروتئين MAGI2 به عنوان يك چهارچوببه پايداريPTEN كمك كرده و باعث افزايش عملكرد آن مي‌شود. از آنجا كه miR 101 باعث كاهش بيان ژن MAGI2 شده به طور غيرمستقيم مي‌تواند باعث كاهش عملكرد PTENنيز باشد. روش بررسي:سه رده سلوليLnCap ،PC3 و DU 145 سرطان پروستات جهت بررسي بيانژن‌هاي PTEN, MAGI 2و miR 101مورد مطالعه قرار گرفتند.براي ارزيابي بيان ژن‌هاي مورد نظر از تكنيكReal time PCR با استفاده ازTaqMan probeاستفاده شد. با مقايسه سيكل‌هاي آستانه، نسبت بيان mRNA ژن مورد نظر بر اساس روش ∆∆CT محاسبه شد.نتايج:. نتايج نشان داد بيان miR 101 وMAGI2در هر سه رده سلولي نسبت به بافت سرطان پروستات كاهش داشته است.با وجود بالا بودن ميزان بيان miR 101 در بافت سرطان پروستات، ميزان بيان MAGI2 در اين نمونه كاهش معني‌داري نشان نداد. بيان ژن PTEN در دو رده سلولي LnCap و PC3 بسيار پايين تر از سلول‌هاي DU 145 بود كه نشان دهنده از دست رفتن كامل ژن در سطح DNA مي‌باشد. نتيجه‌گيري:اينيافته تاييد كننده احتمال از دست رفتن بيان هر دو ژن PTEN و MAGI2 در رده‌هاي سلولي LnCap و PC3 مي‌باشد. اين امر مي‌تواند ناشي از بازآرايي ژنتيكي در ژن MAGI2 باشد.

Introduction: Defects in PTEN gene play an important role in the initiation of the prostate cancer. MAGI2 is recognized as a frame which assists in stabilizing PTEN protein and enhances its tumor suppressor function. As miR-101 down-regulates MAGI2 expression, it can indirectly cause to reduce the PTEN activity. Methods: LnCap, PC3 and DU-145 prostate cancer cell lines were studied in order to investigate expression of PTEN, MAGI2 and miR-101 using TaqMan probe Real-time PCR assay. The relative expression of each gene was determined based on their CT value and CT method. Results: The study results demonstrated that miR-101 and MAGI2 expression was down-regulated in all the three cell lines in comparison to prostate cancer tissue. However, despite the high expression of miR-101 in prostate cancer tissue, MAGI2 expression was not significantly affected in this sample. The expression of PTEN gene in LnCap and PC3 cells was significantly lower than its expression in DU-145 cells. This can be explained by the complete loss of the PTEN gene at DNA level. Conclusion: The findings of the present study confirmed the loss of the expression of PTEN and MAGI2 genes in PC3 and LnCap cells, which may be due to MAGI2 gene rearrangements in a mutually exclusive manner.