اعتباربخشي روش اندازه گيري آفلاتوكسين M1 در ماست

Validation of a method for determining Aflatoxin M1 in yoghurt

اعتبار بخشي اندازه گيري آفلاتوكسين در ماست بر اساسBS EN ISO 14501/2007 صورت گرفت. در اين پژوهش از شير خشك فاقد آفلاتوكسين (ساخت كشور هلند) براي توليد ماست استفاده گرديد و با اضافه كردن آفلاتوكسين نمونه هاي پژوهش تهيه شد. اساس آزمايش، بر مبناي استخراج با ستون ايمونوافينيتي و در تزريق به دستگاه HPLC با شناساگر FLD بود و تنظيمات دستگاهي طبق استاندارد انجام گرديد. براي رسيدن به بهترين شرايط ممكن جهت شناسايي آفلاتوكسين و اطمينان از تفكيك آفلاتوكسين M1، كنترل هاي دستگاهي از جمله مهم­ترين آن­ها، كنترل جريان فاز متحرك و نسبت تركيبات تشكيل دهنده فاز متحرك اعمال شد. جهت صحه گذاري روش آزمون هاي صحت و دقت، گزينش ­پذيري و تداخلات، حد تشخيص و حد تعيين، تكرارپذيري و تكثيرپذيري به منظور مناسب بودن داده ها، مورد ارزيابي قرار گرفت. مطابق اين روش پس از جداسازي و خالص سازي حداكثر ميزان بازيافت در غلظت ppb 0/025 معادل 74/28 درصد، حداكثر ميزان بازيافت در غلظت ppb 50 معادل 80/89 درصد و حداكثر ميزان بازيافت در غلظت ppb 75 معادل 86/77 درصد با RSD در رنج % 8/41 - %2/56 بدست آمد. اين روش نسبت به ساير روش ها سريعتر زمان بازداري كوتاه تر و از دقت و صحت بسيار بهتري برخوردار است و براي اندازه گيري دقيق مقادير آفلاتوكسين M1 در ماست مناسب است.

Validating for detecting aflatoxin M1 in yoghurt according to Commission Decision BS EN ISO 14501:2007. In this study yoghurt samples prepared with milk powder without aflatoxin (Made in Holland) and then artificially contaminated by adding aflatoxin M1. Analytical method using immunoaffinity column for extraction and a high-performance liquid chromatography (HPLC) with FLD detector for quantification was performed according to the device settings. To achieve the best possible condition to identify and ensure the separation of aflatoxin M1, deploying some important device control such as, control the flow of the mobile phase and the mobile phase constituents was applied. The procedure for determining selectivity, recovery, precision, decision limit (CCα) and detection capability (CCβ) of the method has been reported. The method includes a preliminary clean-up and the average recoveries determined on three different days at the concentration levels of 0.025, 0.050 and 0.075 μg kg⁻¹ were in 74.28%, 80.89 and 86.77% respectively with RSD in the range of 2.56%-8.41%. The interday and interlevel mean recovery value, which has been used to correct routine analysis results, was 80%. The method is rapid, easily automatable with low retention time and high accuracy therefore useful for accurate and precise screening of aflatoxin M1 in yoghurt.