ارزيابي همبستگي بين حضور ژن هاي توليد كننده شيگا توكسين (stx1 و stx2 ) در اشرشيا كلي O157 H7 با پارامترهاي ميكروبي و شيميايي در شير خام

Evaluation of the correlation between the presence of Shiga toxinproducing gene (stx1 and stx2) in Escherichia Coli O157 H7 with biological and chemical parameters of raw milk

باكتري اشرشياكلي توليد كننده شيگا توكسين يكي از مهمترين عوامل بيماري زا در صنعت فرآورده هاي لبني محسوب مي‌شود. پاستورزاسيون شير به منظور جلوگيري از رشد ميكروبي تاثيري بر سميت توكسين هاي توليد شده ندارد. لذا شناسايي دقيق و سريع عامل توليد كننده، مي تواند از مسموميت هاي غذايي جلوگيري كند. هدف از اين تحقيق ارزيابي همبستگي بين حضور ژن هاي توليدكننده شيگاتوكسين (stx1 و stx2) در اشرشياكلي O157: H7 باپارامترهاي ميكروبي وشيميايي درشيرخام بود. از اينرو،30 نمونه شير خام از مراكز توزيع مواد لبني و گاوداري هاي سطح شهرستان مشهد به شكل تصادفي جمع آوري و به منظور غربالگري و جداسازي باكتري اشرشياكليO157: H7 كشت اختصاصي داده شد. پس از استخراج DNA از سويه هاي جدا شده، واكنش زنجيره اي پلي مراز جهت شناسايي ژن هاي 16srRNA، stx1 و stx2 انجام شد. نتايج كشت ميكروبي و واكنش زنجيره اي پلي مراز به ترتيب نشان داد كه 62 و 89 درصد از نمونه هاي شيرخام حاوي اشرشياكلي O157: H7 بودند. همچنين 88 درصد اشرشياكلي هاي توكسين زاي شناسايي شده حاوي ژن stx1 بودند در حاليكه ژن stx2 در هيچ باكتري مورد مشاهده نشد. ضريب همبستگي بين حضور ژن توليدكننده شيگاتوكسين (stx1) در اشرشياكليO157: H7 با دامنه شمارش باكتري هاي مزوفيل، دامنه شمارش اشرشياكلي، دامنه اسيديته، دامنه pH، دامنه ماده خشك بدون چربي، دامنه چربي و دامنه ضريب هدايت الكتريكي به ترتيب 0/174، 0/474، 0/992، 0/177، 0/724، 0/622 و 0/897 برآورد شد. نتيجه اين تحقيق نشان داد كه پارامترهاي شيميايي شير خام از همبستگي بالايي با حضور ژن شيگاتوكسين (stx1) در اشرشياكلي O157: H7 برخوردارند.

One of the most important Shiga toxin-producer in dairy product is Escherichia coli O157. Milk pasteurization has not any effect on toxicity of the shigatoxin; it’s just preventing of microbial growth. Therefore, rapid and accurate detection of E.coli O157 can help to prevent food poisoning. The aim of this study was to evaluate the correlation between the presence of Shiga toxin-producing genes (stx1 and stx2) with microbial and chemical parameters in raw milk. 30 samples of raw milk randomly were collected from dairy product distributors of Mashhad. Isolation of E. coli O157 H7 was done by specific culture. After DNA extraction, of 16s rRNA, stx1 and stx2 gene was screened by Polymerase Chain Reaction (PCR). The specific culture and PCR results showed that 62% and 89% of samples were contaminated by E. coli O157 H7, respectively. Also, Stx1 gene was detected in 88% of shiga toxin E.coli and Stx2 gene was not present in any of the isolates tested in this study. The correlation between the presences of Shiga toxin-producing gene (Stx1) with mesophilic bacteria enumeration, enumeration of E. coli, acidity, pH, Non-fat dry matter, fat content and domain of electro condactivity was estimated 0/174, 0/474, 0/992, 0.177, 0/724, 0/622 and 0/897, respectively. Our findings indicated that there is high correlation between chemical parameters of raw milk with the presence of shigatoxin genes in E. coli O157 H7.