عنوان مقاله :
تاثير نوروپپتيد Y بر تكثير سلولهاي بنيادي خونساز بند ناف
عنوان به زبان ديگر :
The impact of neuropeptide Y on expansion of cord blood hematopoietic stem cells
پديد آورندگان :
مرادي نسب، سوسن مركز تحقيقات انتقال خون - مؤسسه عالي آموزشي و پژوهشي طب انتقال خون , پورفتح اله، علي اكبر مركز تحقيقات انتقال خون - مؤسسه عالي آموزشي و پژوهشي طب انتقال خون , عطاردي، كامران مركز تحقيقات انتقال خون - مؤسسه عالي آموزشي و پژوهشي طب انتقال خون
كليدواژه :
خون بند ناف , سلولهاي بنيادي خونساز , نوروپپتيدY
چكيده فارسي :
سابقه و هدف
تعداد كم سلولهاي بنيادي خونساز خون بند ناف يك محدوديت جهت مصارف باليني است. از اين رو تكثير آزمايشگاهي اين سلولها به منظور دستيابي به تعداد مناسب براي مقاصد درماني ضروري است. سيستم عصبي سمپاتيك و نوروترنسميترها در تنظيم خود نوسازي، تكثير و تمايز سلولهاي بنيادي خونساز در ريز محيط مغز استخوان نقش دارند. هدف از مطالعه، ارزيابي قدرت تكثيري نوروپپتيد Y در سلولهاي خونساز در شرايط آزمايشگاهي بود.
مواد و روشها
در يك مطالعه تجربي، مقايسه كشت سلولهاي بنيادي خونساز پس از جداسازي آنها در حضور فقط سايتوكاين (SCF، TPO، FLT3 L) به عنوان گروه كنترل و در شرايط تيمار شده با غلظت1 ميكرومولار نوروپپتيد Y علاوه بر سايتوكاين به عنوان آزمون انجام پذيرفت. در روز 7 تعداد تام سلولهاي هستهدار و سلولهاي CD34+ محاسبه گرديد. قدرت كلنيزايي سلولهاي تزايد يافته بررسي شد. آزمون LTC-IC نيز جهت بررسي قدرت كلنيزايي در كشت طولاني مدت انجام شد.
يافتهها
تكثير 7 روزه سلولهاي بنيادي خونساز بند ناف منجر به افزايش معنادار سلولهاي تام تك هستهاي و CD34+ تيمار شده با نوروپپتيدY در مقايسه با گروه كنترل شد. مشاهده انواع كلنيهاي مختلط، ميلوئيدي و اريتروئيدي در آزمون CFU نشاندهنده حفظ قدرت تمايزي سلولهاي تكثير يافته CD34+ به انواع ردههاي خوني بود. سلولهاي تكثير شده با نوروپپتيد Y قدرت كلنيزايي در كشت طولاني مدت را حفظ كرده بودند.
نتيجه گيري
مطالعه ما نشان داد نوروپپتيد Y ميتواند تكثير سلولهاي بنيادي خونساز را با حفظ قدرت تمايز به انواع ردهها در كشت 7 روزه و در حضور مكمل سايتوكايني حمايت نمايد.
چكيده لاتين :
Background and Objectives
The low number of hematopoietic stem cells (HSCs) in each unit of UCB is a limitation for
clinical application of this source of HSCs. Ex vivo expansion of HSCs to obtain a sufficient
number for therapeutic purposes is necessary. The sympathetic nervous system (SNS) and
neurotransmitters regulate HSCs self-renewality, proliferation and differentiation in the bone
marrow. The aim of this study was to evaluate the proliferative effect of NPY on the CB-HSCs
in ex vivo condition.
Materials and Methods
After isolation of HSCs, the comparison of HSCs Ex vivo expansion using 1 μM NPY and
cytokine as test group with cytokine as control group was performed . TNC number and
CD34+ cell number were calculated on day 7. Colony formation assay was performed in
methylcelloluse medium. LTC-IC assay was performed to investigate colonization potential of
expanded cells in long time culture.
Results
Ex vivo expansion of CB-HSCs after 7 days resulted in significant increase in the number of
total nucleated cells and CD34+ cells in NPY-treated groups in comparison to control group.
The formation of different cell colonies identified as erythrocytic, granulocytic and mix
colonies in CFU assay reflect the differentiation potential of expanded CD34 cells. Treated
group with NPY also retained their ability to formate colonies in long term culture.
Conclusions
Our study demonstrated that Neuropeptide Y can successfully support expansion of CD34+
hematopoietic stem cells while retaining their potential of being differentiated into various cell
lineages after 7-day culture period with cytokine supplementation.