تعيين سطح سرمي كمپلكس IgA-α1-antitrypsin در بيماران مبتلا به آرتريت روماتوئيد

Measurement of serum level of IgA-α1-AT complex in patients with rheumatoid arthritis

سابقه و هدف آرتريت روماتوئيد يك بيماري مزمن التهابي شديد مي‌باشد. در بيماري‌هاي التهابي از جمله آرتريت روماتوئيد ميزان IgA در سرم افزايش مي‌يابد كه به‌دنبال آن IgA اضافي مي‌تواند با برخي از پروتئين‌هاي موجود درسرم از جمله آلفا-1-آنتي تريپسين ( a 1 AT ) ميانكنش داشته و تشكيل كمپلكس غيرايمني بدهد. آزمايش‌هاي سرولوژي رايج تشخيصي براي آرتريت روماتوئيد از جمله RF ، ESR و CRP در مواردي پاسخ منفي كاذب دارند اما براساس تحقيقات اخير مشخص شده است كه در بيماري آرتريت روماتوئيد ميزان اين كمپلكس افزايش و پس از درمان كاهش مي‌يابد، لذا مي‌توان از آن به‌عنوان يك عامل تشخيصي استفاده نمود. مواد وروش‌ها مطالعه انجام شده تجربي، آزمايشگاهي بود. در اين تحقيق ميزان كمپلكس IgA – a 1 AT در سرم 37 بيمار مبتلا به آرتريت روماتوئيد (با تشخيص قطعي پزشك) و 44 فرد طبيعي به‌عنوان كنترل توسط روش اليزا با استفاده از آنتي‌بادي منوكلونال ضد a 1 AT و آنتي‌بادي پلي كلونال ضد IgA كونژوگـه شده با HRP (Horse Radish Peroxidase) براي اولين بار در ايران و در آزمايشگاه بيوشيمي انجام شد . هم چنين ميزان ESR ، CRP و RF كه آزمايش‌هاي معمول جهت تشخيص بيماري مي‌باشند در سرم بيماران و افراد طبيعي نيز اندازه گيري گرديد . يافته‌ها نتايج نشان داد كه اختلاف ميزان كمپلكس IgA – a 1 AT در سرم بيماران نسبت به افراد كنترل به لحاظ آماري معني‌دار است (15/4 ± 43/7 در بيماران و 8/3 ± 21/5 در افراد طبيعي) (p<0.05 ). همچنين عليرغم اين‌كه RF در 11 بيمار (30% كل بيماران) منفي به‌دست آمد، كمپلكس IgA – a 1 AT تنها در يك بيمار (3%) از ميانگين افراد طبيعي گزارش شده كمتر بود. اين امر نشان‌دهنده اين است كه پاسخ‌هاي منفي كاذب درمورد ميزان سرمي كمپلكس IgA – a 1 AT توسط روش اليزا نسبت به آزمايش RF به‌شدت پايين است. نتيجه گيري از مطالعه انجام شده نتيجه‌گيري مي‌شود‌كه تعيين ميزان كمپلكس IgA- a 1 -antitrypsin در بيماران مبتلا به آرتريت روماتوئيد به‌عنوان شاخص مراحل پيشرفت بيماري پيشنهاد مي‌شود كه با روش اليزا قابل انجام است.

Background and Objectives Rheumatoid arthritis (RA) is a severe chronic inflammatory disease that can not be easily rapidly treated. It can cause joint destruction and disability. Generally some laboratory tests, such as Rheumatoid Factor (RF), Erythrocyte Sedimentation Rate (ESR) or C-Reactive Protein (CRP) can be used for diagnosis and monitoring of the rheumatoid arthritis. However, they are not always ideal. In inflammatory diseases such as rheumatoid arthritis, the level of IgA will increase in serum; the surplus IgA can then react with some of the serum proteins such as Alpha-1-antirypsin (1AT) to form a non-immune complex. The complex IgA – 1AT is formed by disulfide bonding between an active thiol group available on the both proteins. Some reports suggested that this complex is a good marker for RA disease without false results, while RF test has some false negative results. Materials and Methods In this study the level of IgA-1AT complex in thirty seven RA patients and in forty four normal subjects by ELISA methods using anti-1-antirypsin monoclonal and anti-IgA polyclonal HRP conjugated antibodies was evaluated. Routine laboratory tests of RF, CRP and ESR in patients and controls were also investigated. Results Our results showed that IgA-1AT complex level in patients (43.7 ± 15.4) is significantly higher than controls (21.5 ± 8.3) (p<0.05). There were significant differences between the sera complex levels in patients and controls. The RF results revealed eleven false negatives (30%) while the level of complex had only one false result (3%). Conclusions Instead of RF, a rapid and sensitive ELISA test for IgA-1AT complex level in RA patients is strongly recommended.