روشي مقرون به صرفه براي توليد آلبومين انساني با غلظت 20 گرم درصد

A cost- effective process for production of human serum albumin 20%

سابقه و هدف در حال حاضر آلبومين بيشترين حجم مصرفي را در ميان محلول‌هاي زيست دارويي دارد. رايج‌ترين روش توليد صنعتي آلبومين انساني، روش Cohn و يا پالايش پلاسما با اتانل در سرما مي‌باشد. به‌منظور صرفه‌جويي در زمان، مواد و نيروي انساني، در توليد آلبومين با غلظت 20 گرم درصد، روشي دو مرحله‌اي بر اساس روش پالايش با اتانل در سرما ارايه و مورد مطالعه قرار گرفت. مواد و روش‌ها بررسي انجام شده از نوع تجربي بوده و از پلاسماي تازه منجمد شده (FFP) به‌عنوان ماده اوليه استفاده‌گرديده‌است. در مرحله اول با افزودن محلول رويي4 (سوپرناتانت IV ) به خمير V حل شده در آب مقطر تزريقي و با تنظيم شرايط و استفاده از سانتريفوژ ، محصول حد واسطي به نام خمير Vd+I ( خمير V متراكمي كه در بردارنده بيشترين غلظت آلبومين و كمترين مقدار ناخالصي از نوع پروتئين، الكتروليت و اتانل است) جداسازي گرديد و در مرحله دوم به‌منظور حذف ناخالصي جزيي از جنس آلفا گلوبولين‌ها، خمير به‌دست‌آمده در آب مقطر حل شد و با انجام فيلتراسيون ژرف، محلول پروتئيني با خلوص بالا به‌دست‌آمد ( HPs ) كه شرايط لازم براي توليد آلبومين 20 گرم درصد پاستوريزه (جهت ويروس زدايي) را داشت. با اين روش دو سري ساخت توليد گرديد و ارزيابي كيفيت محصول نهايي مطابق با مقررات فارماكوپه صورت گرفت. يافته‌ها محصولات حد واسط به‌دست‌آمده در روش پيشنهادي ( Vd+I و HPs ) در مقايسه با محصولات حد واسط روش رايج ( Vd و HPs ) از نظر ظاهري و نتايج بيوشيميايي، شباهت بسيار نزديكي به يكديگر داشتند. كنترل كيفي محصول نهايي براي دو سري ساخت با روش نمونه‌برداري تصادفي از ظروف شيشه‌اي پر شده صورت گرفت. به‌طوري‌كه ظاهر محصول شفاف، خلوص آلبومين بيش از 99 درصد ، ميزان اگريگيت و يا پليمر با ميانگين كمتر از 2/7درصد و بازده محصول نيز 1 ± 24 گرم به ازاي كيلوگرم پلاسما به‌دست‌آمد. نتيجه‌گيري با اجراي اين روش، صرفه‌جويي چشم‌گيري در فرآيند استحصال محصولات حد واسط ( خمير Vd+I و HPs ) كه در مسير توليد آلبومين انساني با غلظت 20 گرم درصد به‌كار برده مي‌شوند، صورت گرفت به‌طوري‌كه مدت زمان انجام كار، مصرف مواد و به‌كارگيري نيروي انساني در مقايسه با روش‌هاي رايج پالايش پلاسما با اتانل در سرما ( روش‌هاي Cohn و Kistler-Nitschmann ) به بيش از 50 درصد تقليل يافت.

Background and Objectives Albumin is currently used in greater volume than any other biopharmaceutical solution that is available. The most large- scale production of human albumin is still conducted by cohn cold ethanol fractionation (Cohn's method). In order to save the operating time, labor and material in manufacturing albumin 20%, a two-stage process was carried out based on the cold ethanol fractionation method. Materials and Methods For this experimental study, fresh frozen plasma (FFP) was used as a starting material. In the first stage by addition of supernatant IV to a dissolved fraction V paste, a dense fraction V paste (Vd+I) containing the highest possible albumin concentration and the least impurity (ethanol,  globulins and ionic concentration) was recovered by centrifugation; the recovered paste was then dissolved and filtered through a depth filter in order to remove  globulins as impurity. The filtrate (HPs) was suitable to produce albumin 20%. Two batches were produced and all the methods for the evaluation of the finished product were applied according to the guidelines of the British Pharmacopoeia. Results The quality control of the albumin 20% as a finished product from 2 batches (batches 1 and 2) in the final container produced by the proposed procedure led to satisfactory results. Appearance of the product was clear, purity over 99% , and the molecular size distribution of albumin was revealed for aggregates or polymers less than 2.7 % . The yield of albumin was 24 ± 1 gr/kg of plasma. Conclusions Advantages of the proposed process as compared with the rountine process (Cohn & Kistler- Nitschmann methods) during the production of intermediate products (Vd+I, HPs) were remarkable savings in terms of operating time, material and manpower at about 50%.