بررسي اثر پروتئين التهابي ماكروفاژ MIP1-αبر تكثير سلول هاي پايه خونساز خون بند ناف

Evaluation of the effects of MIP1- on ex vitro expansion of hematopoietic progenitor cells in different culture media for the purpose of cord blood transplantation

سابقه و هدف خـون بنـد نـاف (UCB) يـك منبع غني از سلول‌هاي پايه خونساز (HSCs) است و مي‌تواند به جاي پيوند مغز استخوان مورد استفاده قرار گيرد. براي تسريع پيوند با خون بند ناف، لازم است سلول‌هاي پايه خونساز در محيط ex vivo تكثير شوند. لذا در اين مطالعه اثر پروتئين التهابي ماكروفاژ (MIP1- a ) در شرايط كشت مختلف بر تكثير و ممانعت از تمايز سلول‌هاي خونساز خون بند ناف مورد ارزيابي قرار گرفت. مواد وروش‌ها مطالعه انجام شده از نوع تجربي بود. سلول‌هاي تك هسته‌اي (MNCs) از خون بند ناف جداسازي و در محيط كشت RPMI 1640 همراه با 10 درصد سرم جنين گاوي (FCS) و يا 10 درصد پلاسماي خون بند ناف (CBP) و محيط فاقد سرم (SF) همراه با ng/ml 50 از تركيب سايتوكايني اينترلوكين 6 (IL-6) ، اينترلوكين 3 (IL-3) ، ترمبوپوتئين (TPO) ، فاكتور رشد سلول‌هاي پايه (SCF) و ليگاند تيروزين كيناز كبد جنيني (FLt3-L) در حضور يا عدم حضور ng/ml 50 از فاكتور MIP1- a به مدت دو هفته كشت داده شدند. يافته‌ها به طور كلي ميانگين افزايش درصد سلول‌هاي CD34+/CD38- و CD34+ در تمامي محيط‌هاي حاوي MIP1- a نسبت به محيط‌هاي كنترل فاقد آن بالاتر بود. نتيجه گيري به نظر مي‌رسد كه اثر MIP1- a به محتواي سايتوكايني و حضور يا عدم حضور سرم در محيط بستگي دارد و حضور MIP1- a همراه با تركيب سايتوكايني ذكر شده باعث افزايش تعداد اين سلول‌ها مي‌شود.

Background and Objectives Umbilical cord blood (CB) has been identified both as a rich source for hematopoietic stem cells (HSCs) and as an alternative to bone marrow transplantation. To accelerate the pace of engraftment in cord blood (CB) transplantation, HSCs should be ex vivo expanded. So the aim of this study was to evaluate the effects of macrophage inflammatory protein-1 alpha (MIP1-) on ex vivo expansion of HSCs and its role in prevention of HSCs differentiation in different conditions. Materials and Methods Mononuclear cells (MNCs) were seperated from cord blood and cultured in RPMI 1640 with 10% fetal calf serum (FCS) or 10% cord blood plasma (CBP) or serum free media (SF). Culture media contained 50 ng/ml of interlukin 6 (IL-6), interlukin 3 (IL-3), thrombopoietin (TPO), stem cell factor (SCF), and flt3-ligand. MNCs were cultured for 2 weeks in the presence or absence of MIP1- in CO2 incubator; expansion potential was then studied by MNCs counting and flowcytometry for CD34+/CD38- cells in 7 and 14 days. Results In all MIP1- contained media, more increase in expansion of CD34+/CD38- and CD34+ cells was observed. Conclusions These results suggest that the effect of MIP1- depends on type of medium and the cytokines present in the culture; it also shows that addition of MIP1- is useful for clinically ex vivo expansion of cord blood-derived progenitor cells.